[發明專利]一種白花虎眼萬年青同源結構域轉錄因子OtPHD1基因及應用

有效

• 申請號: 202010053264.9
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN111118027B
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 姜福星;黃遠祥;周鵬;何偉;李西;孫大江
• 申請（專利權）人: 四川天藝優境環境科技有限公司;四川農業大學;四川天藝生態園林集團股份有限公司
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;C12N5/10;A01H6/00
• 代理公司: 成都天匯致遠知識產權代理事務所(普通合伙) 51264
• 代理人: 韓曉銀

1.一種白花虎眼萬年青同源結構域轉錄因子Ot PHD1基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一種權利要求1所述的白花虎眼萬年青同源結構域轉錄因子Ot PHD1基因編碼的蛋白，其氨基酸如SEQ ID NO.2所示。

3.一種含有權利要求1所述的白花虎眼萬年青同源結構域轉錄因子Ot PHD1基因的表達載體。

4.一種白花虎眼萬年青同源結構域轉錄因子Ot PHD1基因的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1、在無菌的超凈工作臺上，剪取白花虎眼萬年青的離體葉片，放到含有細胞分裂素6BA的培養基上進行離體培養和珠芽的誘導；

步驟2、待白花虎眼萬年青的離體葉片上產生珠芽后，剪取珠芽并提取其RNA，并反轉錄獲得cDNA模板；

步驟3、對cDNA模板進行PCR擴增，獲得Ot PHD1基因編碼區PCR產物；所述PCR擴增的引物包括Ot PHD1F和Ot PHD1 R，其核苷酸序列分別如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；對OtPHD1基因編碼區PCR產物連接到T載體中，將其轉入大腸桿菌感受態中，涂布平板，37℃倒置培養后挑取單克隆進行PCR鑒定及測序，得到核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的Ot PHD1基因，其所編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

5.一種權利要求3所述的表達載體的構建方法，其特征在于，該方法中用到的無縫連接引物包括XbaIOt PHD1F和KpnIOt PHD1R；其核苷酸序列分別如SEQ IDNO.5和SEQ ID NO.6所示。

6.權利要求1所述的白花虎眼萬年青同源結構域轉錄因子Ot PHD1基因在分子水平提高植物對鹽堿非生物脅迫的抗性育種中的應用。

7.根據權利要求6所述的應用，其特征在于，所述植物為鱗莖球根花卉。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述鱗莖球根花卉為白花虎眼萬年青。