[發明專利]同時靶向BCMA和CD38的嵌合抗原受體及其應用

有效

• 申請號: 202010052549.0
• 申請日: 2020-01-17
• 公開（公告）號: CN111171158B
• 公開（公告）日: 2020-10-30
• 發明（設計）人: 李俊;郭志剛
• 申請（專利權）人: 南京藍盾生物科技有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 楊曉莉

本發明涉及醫藥生物領域，尤其涉及一種同時靶向BCMA和CD38的嵌合抗原受體及其制備方法；本發明公開了一種針對多發性骨髓瘤細胞表面BCMA和CD38雙靶點的嵌合抗原受體的構建與應用。本發明以BCMA抗原和CD38的空間表位為靶點，將BCMA抗體的scfv區，CD38抗體的scfv區，CD8的跨膜區，4?1BB胞內信號區，CD3zeta胞內信號區，進行串聯，構建的嵌合抗原受體用于治療多發性骨髓瘤，以解決CAR?T細胞療法在在治療多發性骨髓瘤中的高復發問題；有效治療多發性骨髓瘤瘤，并為多發性骨髓瘤復發/轉移的有效防治提供新策略。

技術領域

本發明涉及醫藥生物技術，尤其涉及一種同時靶向BCMA和CD38的嵌合抗原受體及應用。

背景技術

多發性骨髓瘤(MM)，是以骨髓中漿細胞異常增殖為特征的惡性“克隆性疾病”，僅有25％的患者接受化療后生存期在5年以上；在血液學惡性腫瘤中，其發病率僅次于非霍奇金淋巴瘤，是第三大常見血液腫瘤，全世界每年新增病例約114,000例；自1959-2017年，針對多發性骨髓瘤已上市20款藥物，主要集中于蛋白酶抑制劑、免疫調節劑，這些新的治療手段使MM患者的生存率有了很大的提高。然而值得關注的是，大部分的MM患者經過多次治療后,依舊會出現復發；故更為安全有效的藥物，仍為臨床急需。

BCMA(B-cell maturation antigen)是B細胞成熟抗原，由185個氨基酸殘基組成的III型跨膜蛋白，屬TNF受體超家族，其配體屬于TNF超家族，如增殖誘導配體(APRIL)B淋巴細胞刺激因子(BAFF)，BCMA與其配體結合后，可激活B細胞的增殖和存活。BCMA特異高表達于漿細胞和多發性骨髓瘤細胞表面，而在造血干細胞和其他正常組織細胞中均不表達，因此，BCMA可以作為MM的靶向性治療的理想靶點。

目前以BCMA為靶點的抗體主要有CA8(專利：US 20140105915A1)；C11D5.3、C12A3.2(專利：WO 2010104949A2)；J22.9-xi(PDB：4ZFO)；13A4(專利：WO 2014122143)，實驗數據顯示這些抗體與BCMA有很好的結合，并可以很有效地阻斷配體與受體的結合，在體外對BCMA高表達的細胞有很強的結合率，以及抑制由BAFF和APIRL誘導引起的增殖抑制作用，同時臨床前荷瘤鼠模型中均顯示出很好腫瘤細胞清除率，其中以鼠源抗體CA8為基礎設計的ADC藥物(J6M0-mcMMAF)進入臨床治療階段。Nitya S等設計出了以C11D5.3為基礎的，通過化學偶聯得到的BCMA、CS1雙特異性Fab抗體，發現其對多發性骨髓瘤細胞有更強的抑制作用。

CD38分子是單鏈Ⅱ型跨膜糖蛋白，催化環腺苷二磷酸核糖的合成和降解，參與鈣動員，與受體調節的黏附作用密切相關。所有多發性骨髓瘤細胞均高表達，正常情況下在一些非造血組織的淋巴細胞、骨髓細胞相對低表達.Kong等證明了新型鼠抗人CD38單抗daratumumab可通過補體介導細胞毒作用(CDC)或抗體依賴性細胞毒作用在無論骨髓基質細胞是否存在的條件下殺傷CD38+骨髓瘤細胞。另外，結合daratumumab和抗免疫球蛋白G抗體可誘導骨髓瘤細胞凋亡。鼠多發性骨髓瘤模型研究發現，雷利度胺預處理瘤細胞，daratumumab的抗體依賴性細胞毒作用殺傷作用加強.

嵌合抗原受體(CAR)是模擬T細胞受體功能的人工受體，其融合了抗原與抗體或配體與受體的識別和結合特異性以及效應T細胞對被識別的腫瘤細胞的殺傷能力。CAR由CD8a引導肽、抗原識別區(配體或單鏈抗體或Fab片段)、跨膜區、以及T細胞的一系列信號轉導區(CD28，CD3，CD137胞內信號傳導結構域)依次連接而成。T細胞經修飾后，表面表達的CAR首先通過抗原識別區與腫瘤細胞表面抗原結合，然后通過其信號轉導區將活化信號傳遞至胞內，靶向地激活T細胞對腫瘤細胞殺傷活性。將表達CAR的DNA序列克隆入慢病毒表達載體，并感染從患者血中分離出的T細胞，使T細胞表面表達相應的CAR，再將此修飾的T細胞再輸回患者體內，修飾后的T細胞可以在患者體內靶向性地殺傷表達相關抗原的腫瘤細胞，達到清除腫瘤細胞的效果。