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[發明專利]一種綿羊RORA基因插入/缺失多態性的檢測方法、引物對和應用有效

專利信息
申請號: 202010050996.2 申請日: 2020-01-17
公開(公告)號: CN111088369B 公開(公告)日: 2022-11-15
發明(設計)人: 張清峰;楊鈺塔;程志強;潘傳英;林春建;韓旭飛;盧小芳;藍賢勇 申請(專利權)人: 天津奧群牧業有限公司
主分類號: C12Q1/6888 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11
代理公司: 天津盛理知識產權代理有限公司 12209 代理人: 李晶
地址: 301600 *** 國省代碼: 天津;12
權利要求書: 查看更多 說明書: 查看更多
摘要:
搜索關鍵詞: 一種 綿羊 rora 基因 插入 缺失 多態性 檢測 方法 引物 應用
【權利要求書】:

1.一種綿羊RORA基因插入/缺失多態性檢測用引物對在綿羊產羔數分子標記輔助選擇育種方面中的應用,所述綿羊RORA基因插入/缺失多態性檢測用引物對能夠用于PCR擴增綿羊RORA基因NC_040258.1:S.10400_10423位23-bp插入/缺失多態性位點;

所述引物對為:

上游引物:SEQ NO.1;

下游引物:SEQ NO.2。

2.一種綿羊RORA基因插入/缺失多態性的檢測方法在綿羊產羔數分子標記輔助選擇育種方面中的應用;所述綿羊RORA基因插入/缺失多態性的檢測方法的步驟如下:

以待測綿羊基因組DNA為模板,以引物對為擴增引物,利用PCR擴增包含綿羊RORA基因內含子區插入/缺失多態性位點的片段,對擴增產物進行電泳,根據電泳結果鑒定所述插入/缺失多態性位點的基因型;

其中,所述插入/缺失多態性位點選自綿羊RORA基因 NC_040258.1:S.10400_10423位23-bp插入/缺失多態性位點;

所述引物對能夠用于PCR擴增綿羊RORA基因NC_040258.1:S.10400_10423位23-bp插入/缺失多態性位點;

所述引物對為:

上游引物:SEQ NO.1;

下游引物:SEQ NO.2。

3.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:所述插入/缺失多態性位點的插入/缺失基因型作為提高綿羊第2胎、第3胎產羔數的DNA標記。

4.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:所述PCR擴增采用的反應程序為:95 ℃預變性5 min;94 ℃變性30 s,68 ℃退火30 s,72 ℃延伸12~24 s,18個循環,每循環后退火溫度減1 ℃;50 ℃退火30 s,72 ℃延伸12~24 s,25~30個循環;72 ℃延伸10 min。

5.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:所述電泳時采用質量濃度為3.0~3.5%的瓊脂糖凝膠。

6.根據權利要求2所述的應用,其特征在于:根據電泳結果,所述插入/缺失多態性位點的插入/插入基因型 II 表現為195bp一條帶紋,插入/缺失基因型 ID 表現為195 bp和172bp兩條帶紋,缺失/缺失基因型 DD 表現為172bp一條帶紋。

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