[發(fā)明專利]CYP3A2基因作為高原鼢鼠抗藥性檢測的分子標記及其引物、制備方法、應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010049286.8
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111154890A
• 公開（公告）日: 2020-05-15
• 發(fā)明（設計）人: 蘇軍虎;譚宇塵;孫小妹;徐長林;姚寶輝;劉榮堂
• 申請（專利權）人: 甘肅農業(yè)大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12N15/11;C12Q1/6806
• 代理公司: 甘肅省知識產權事務中心 62100
• 代理人: 馬英

1.一種CYP3A2基因作為高原鼢鼠抗藥性檢測的分子標記，其特征在于，它的核苷酸序列如下所示：

外顯子5：TGGTCCAGCGGGATTTATGAGAAAGGCCATGAGCAAAGCTAAGGATGAAGAATGGAAGAGAATACGAACATTGTCTGTCTCCAGCCTTCACCAGTGGCAAACTCAA

外顯子12：TAGCAAGAAGAACAAGGGTAGCATCGATCCTTATATATACATGCCCTTCGGGAATGGACCAACGGAACTGCCTTGGCATGAGGTTTGCTCTCATGAGCATGAAACTTGTTCTTGTGAGAGTCCTGCAAAACTTCTCCTTCCAACCTTGTA

上述序列外顯子5第87bp處的R是A或G；外顯子12第33bp處的R是C或T、第37bp處的R是C或T、第40bp處的R是A或C、第60bp處的R是缺失或插入A、第96bp—99bp處的R是GAGC或CGAT，該突變導致CYP3A2基因多態(tài)性。

2.一種如權利要求1所述的分子標記的檢測PCR引物對，其特征在于，該引物對的DNA序列如下所示：

外顯子5正向引物：TGGTCCAGCGGGATTTATGAG

外顯子5反向引物：GAGTTTGCCACTGGTGAAGG

外顯子12正向引物：AGCAAGAAGAACAAGGGTAGCA

外顯子12反向引物：ACAAGGTTGGAAGGAGAAGTT

3.一種如權利要求1所述的分子標記的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

從高原鼢鼠肌肉組織中提取基因組DNA，在位于高原鼢鼠CYP3A2基因突變位點附近設計一引物對，對高原鼢鼠基因組DNA進行PCR擴增和序列測定，得到如SEQ ID№：2所示的序列，通過序列比對，篩查SNP，再利用所述引物對進行PCR擴增，將PCR擴增獲得的片段進行SSCP—PAGE分型及檢測。

4.權利要求1所述的分子標記在高原鼢鼠抗藥性檢測中的應用。

5.權利要求2所述的PCR引物對在高原鼢鼠抗藥性檢測中的應用。