[發(fā)明專利]雙去乙酰基比沙可啶和單去乙酰基比沙可啶的檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010048737.6
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111208226B
• 公開（公告）日: 2022-11-01
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 賈昌平;鄭佳新;鄭梅;陳麗波;錢葉飛;趙琪;張珊珊;張斌;儲蓉
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州市藥品檢驗檢測研究中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 蘇州吳韻知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32364
• 代理人: 王銘陸

本發(fā)明提供了一種雙去乙酰基比沙可啶和單去乙酰基比沙可啶的檢測方法，采用超高效液相色譜?線性離子阱質(zhì)譜法進行定性篩查、確證及含量測定。色譜條件：色譜柱：C18色譜柱；檢測器：線性離子阱；流動相：A?0.1%乙酸溶液、B?0.1%乙酸?甲醇；流速：0.2?0.6mL/min；柱溫：25?40℃；進樣量：0.1?5μL；洗脫梯度程序：0?5 min，20%?90%B；5?6 min，90%B；6.1?7 min，20%B。本發(fā)明方法可專屬、靈敏、快速地初篩并確證減肥類中成藥和保健食品中添加的雙去乙酰基比沙可啶及單去乙酰基比沙可啶，主要適用于固體劑型的中成藥及保健食品的分析。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)藥檢測領(lǐng)域，涉及化學(xué)品的檢測方法，具體涉及一種雙去乙酰基比沙可啶和單去乙酰基比沙可啶的檢測方法。

背景技術(shù)

比沙可啶是一種接觸性緩瀉藥，通過與腸黏膜的直接接觸，刺激其感覺神經(jīng)末梢，引起腸反射性蠕動增加而導(dǎo)致排便。因為該藥具有一定的瘦身效果，被不法商家添加進減肥類中成藥及保健食品中，對消費者身體健康帶來危害。目前，國家法定檢驗標準（食品中西布曲明等化合物的測定 BJS 201701）已收載了比沙可啶的檢測方法，為禁用成分。

比沙可啶的兩種類似物：雙去乙酰基比沙可啶（CAS號：603-41-8，分子式：C₁₈H₁₅NO₂，分子量：277.1）及單去乙酰基比沙可啶（CAS號：72901-16-7，分子式：C₂₀H₁₇NO₃，分子量：319.1），為比沙可啶生產(chǎn)過程中的雜質(zhì)，具有比沙可啶相同的母核，也具有減肥作用。制假分子為了逃避監(jiān)管，會將這兩種化合物摻入減肥產(chǎn)品中，日前在市售減肥類中成藥及保健食品監(jiān)督檢驗中發(fā)現(xiàn)有添加這兩種成分，但目前還沒有此物質(zhì)的定性、定量檢測方法。本發(fā)明建立了雙去乙酰基比沙可啶及單去乙酰基比沙可啶的快速檢驗方法，以供對兩種去乙酰基比沙可啶的定性篩查及含量測定。

a b

a: 雙去乙酰基比沙可啶 b: 單去乙酰基比沙可啶。

發(fā)明內(nèi)容

要解決的技術(shù)問題：本發(fā)明的目的是提供一種針對減肥類中成藥和保健食品中添加雙去乙酰基比沙可啶及單去乙酰基比沙可啶的檢驗方法，該方法的原理為：將供試品用甲醇提取和過濾，C18色譜柱分離，線性離子阱質(zhì)譜檢測，根據(jù)色譜保留時間、質(zhì)譜一級母離子、二、三級碎片子離子綜合加以確證，并采用多重反應(yīng)監(jiān)測（MRM）模式建立定量方法。

技術(shù)方案：

雙去乙酰基比沙可啶和單去乙酰基比沙可啶的檢測方法，該方法的樣品進樣量為0.1-5 μL；樣品經(jīng)超高效液相色譜-線性離子阱質(zhì)譜法進行分析。

雙去乙酰基比沙可啶和單去乙酰基比沙可啶的檢測方法在檢測減肥類中成藥及保健食品中殘留的應(yīng)用。

雙去乙酰基比沙可啶和單去乙酰基比沙可啶的檢測方法，包括以下步驟：

（1）精密稱取雙去乙酰基比沙可啶及單去乙酰基比沙可啶對照品各5 mg，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋至刻度，作為儲備液；再移取適量，用甲醇逐級稀釋，配成濃度分別為2 ng/mL的對照品溶液。

（2）將供試品制成細粉，混合均勻，精密稱取一次服用量，置于50 mL容量瓶中，加甲醇30 mL，振搖提取30 min，靜置，加甲醇至刻度，混勻，0.22 μm有機濾膜過濾。

（3）采用超高效液相色譜-線性離子阱質(zhì)譜法進行定性篩查：分別取空白溶液、供試品溶液和對照品溶液，注入液質(zhì)聯(lián)用儀中進行檢測。

進一步的，所述超高效液相色譜-線性離子阱質(zhì)譜的檢測條件如下：