[發明專利]香樟葉綠體全基因組PCR擴增引物及其應用

有效

• 申請號: 202010048255.0
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111088387B
• 公開（公告）日: 2023-01-03
• 發明（設計）人: 酈芝汀;蔡恒;胥猛
• 申請（專利權）人: 南京林業大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 南京申云知識產權代理事務所(普通合伙) 32274
• 代理人: 邱興天

1.香樟葉綠體全基因組PCR擴增引物，其特征在于，包括26對引物，其引物核苷酸序列如下：

Cp1上游引物如SEQ ID NO.1所示；Cp1下游引物如SEQ ID NO.2所示；

Cp2上游引物如SEQ ID NO.3所示；Cp2下游引物如SEQ ID NO.4所示；

Cp3上游引物如SEQ ID NO.5所示；Cp3下游引物如SEQ ID NO.6所示；

Cp4上游引物如SEQ ID NO.7所示；Cp4下游引物如SEQ ID NO.8所示；

Cp5上游引物如SEQ ID NO.9所示；Cp5下游引物如SEQ ID NO.10所示；

Cp6上游引物如SEQ ID NO.11所示；Cp6下游引物如SEQ ID NO.12所示；

Cp7上游引物如SEQ ID NO.13所示；Cp7下游引物如SEQ ID NO.14所示；

Cp8上游引物如SEQ ID NO.15所示；Cp8下游引物如SEQ ID NO.16所示；

Cp9上游引物如SEQ ID NO.17所示；Cp9下游引物如SEQ ID NO.18所示；

Cp10上游引物如SEQ ID NO.19所示；Cp10下游引物如SEQ ID NO.20所示；

Cp11上游引物如SEQ ID NO.21所示；Cp11下游引物如SEQ ID NO.22所示；

Cp12上游引物如SEQ ID NO.23所示；Cp12下游引物如SEQ ID NO.24所示；

Cp13上游引物如SEQ ID NO.25所示；Cp13下游引物如SEQ ID NO.26所示；

Cp14上游引物如SEQ ID NO.27所示；Cp14下游引物如SEQ ID NO.28所示；

Cp15上游引物如SEQ ID NO.29所示；Cp15下游引物如SEQ ID NO.30所示；

Cp16上游引物如SEQ ID NO.31所示；Cp16下游引物如SEQ ID NO.32所示；

Cp17上游引物如SEQ ID NO.33所示；Cp17下游引物如SEQ ID NO.34所示；

Cp18上游引物如SEQ ID NO.35所示；Cp18下游引物如SEQ ID NO.36所示；

Cp19上游引物如SEQ ID NO.37所示；Cp19下游引物如SEQ ID NO.38所示；

Cp20上游引物如SEQ ID NO.39所示；Cp20下游引物如SEQ ID NO.40所示；

Cp21上游引物如SEQ ID NO.41所示；Cp21下游引物如SEQ ID NO.42所示；

Cp22上游引物如SEQ ID NO.43所示；Cp22下游引物如SEQ ID NO.44所示；

Cp23上游引物如SEQ ID NO.45所示；Cp23下游引物如SEQ ID NO.46所示；

Cp24上游引物如SEQ ID NO.47所示；Cp24下游引物如SEQ ID NO.48所示；

Cp25上游引物如SEQ ID NO.49所示；Cp25下游引物如SEQ ID NO.50所示；

Cp26上游引物如SEQ ID NO.51所示；Cp26下游引物如SEQ ID NO.52所示。

2.權利要求1所述的引物在香樟葉綠體全基因組序列PCR擴增中的應用，其特征在于，包括以下步驟：

1)提取香樟樣本的DNA；

2)用權利要求1所述的引物對步驟1)提取的DNA進行PCR擴增。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述PCR擴增體系為：上、下游引物各1μL；60ng DNA；25μL PrimerSTAR Max Premix 2×；加ddH₂O至總體系為50μL。

4.根據權利要求2所述的應用，其特征在于，所述PCR擴增程序為：98℃預變性3min；94℃變性10s，55℃退火5s，72℃延伸5s，變性、退火、延伸三個步驟循環35次；最后再72℃延伸4min。

5.權利要求1所述的引物在香樟品種鑒定中的應用。

6.權利要求1所述的引物在樟科葉綠體基因組系統發育研究中的應用。