[發明專利]一種挑選牛體外可移植胚胎的方法

有效

• 申請號: 202010047929.5
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111157710B
• 公開（公告）日: 2021-12-31
• 發明（設計）人: 張景程;張涌;黃玥萌;張敏;王永;李赫強;王勇勝
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: G01N33/48
• 分類號: G01N33/48
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 王敏

1.一種挑選牛體外可移植胚胎的方法，其特征在于，具體步驟如下：

(1)從胚胎化學激活完畢或受精完畢開始計為第零天，在胚胎培養至第六天和第七天時進行挑選；

(2)挑選時第六天選擇致密化桑葚胚及早期囊胚：致密化桑葚胚的細胞間連接緊密，四周均有細胞分布，細胞表面光滑無毛刺，細胞中深色脂滴整體著色不能無色或呈黑色；早期囊胚的腔形成，胚胎表面光滑無毛刺，且四周均有細胞分布；

(3)挑選時第七天選擇有腔囊胚及腔擴張囊胚：胚胎囊胚腔達到整個胚胎體積的1/2以上，通過偏光鏡觀察，整體細胞數大于100個，滋養層部分細胞完整，大小均一，內細胞團部分容易辨別且緊致。

2.根據權利要求1所述的一種挑選牛體外可移植胚胎的方法，其特征在于，所述的牛體外可移植胚胎為人工體外制備的可繁育胚胎，包括體細胞核移植過程制備的胚胎和體外受精過程制備的胚胎。

3.根據權利要求2所述的一種挑選牛體外可移植胚胎的方法，其特征在于，所述體細胞核移植過程制備的胚胎選擇正在孵出胚胎，且囊胚腔達到1/2以上；所述體外受精過程制備的胚胎挑選囊胚腔達到整個胚胎體積2/3以上的囊胚。

4.根據權利要求1所述的一種挑選牛體外可移植胚胎的方法，其特征在于，所述胚胎在第六天或第七天進行挑選，為在有偏光功能的體式顯微鏡下，已預熱至38.5℃的胚胎移植液體中進行挑選。

5.根據權利要求4所述的一種挑選牛體外可移植胚胎的方法，其特征在于，所述胚胎在偏光鏡下觀察形態時使用明場光鏡進行觀察。