[發明專利]一種密羅木基因MfWRKY70及其應用

有效

• 申請號: 202010045424.5
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111235160B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發明（設計）人: 黃卓;陳佳;蔣才忠;劉玲;王嘉彤;徐文欣;向香盈;肖瑤;李媛;曹穎
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C07K14/415;C12N15/82;C12N5/10;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 成都正華專利代理事務所(普通合伙) 51229
• 代理人: 李蕊

本發明公開了一種密羅木基因MfWRKY70及其應用。該基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；該基因編碼的蛋白質的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本發明通過對密羅木抗旱WRKY轉錄因子的研究，以對植物的抗逆性能進行改良，提高植物的抗逆能力。

技術領域

本發明屬于植物基因工程技術領域，具體涉及一種密羅木基因MfWRKY70及其應用。

背景技術

干旱和鹽漬化是當今植物面臨的主要非生物災害之一，其主要作用機理是使植物內外滲透壓不一致導致機體脫水。人口的增長，城鎮建設的快速發展，不僅導致民用、工業、農業用水競爭日益激烈，也造成污染加劇，生態系統破壞，水資源短缺，土壤鹽漬化現象日益加劇等現象。因此，發掘抗逆基因，培育抗逆性強的植物新品種，對加快建設資源節約型、環境友好型社會，大力發展綠色經濟，增強可持續發展能力，實現經濟發展和生態文明的有機統一具有重要作用。

基因工程技術是植物抗逆性改良的重要手段。目前，已有不少抗逆基因被報道和應用，其中轉錄因子基因通過與其調控的下游基因啟動子區的順式作用元件結合而調控靶基因的表達，以對外界不良環境做出響應。與植物抗逆性有關的轉錄因子很多，如MYB類、bZIP類、WRKY類、AP2/ERF類和NAC類等。WRKY轉錄因子在植物脅迫響應信號轉導過程也扮演著重要角色。WRKY轉錄因子屬于一類大的轉錄因子家族，參與調控植物生長發育中的多種信號途徑，其典型特征為N端存在著由一段長度大約60個氨基酸所組成的保守WRKY結構域。已有大量研究表明WRKY轉錄因子可受到多種逆境條件如干旱、鹽、射線、低溫、高溫等的誘導，并在植物對逆境的抗性反應中發揮作用。

密羅木主要分布在南非，是地球上為數不多的極耐旱復蘇植物之一，也是唯一的木本復蘇植物。它能夠像種子一樣耐受高度脫水干燥，在組織含水量僅存7％-11％時仍能保持遇水復活的特性。因此，密羅木是一種理想地研究植物抗旱性的材料。然而過去，研究人員主要通過形態學、生理、生化等方面研究了該植物的抗旱機理，但對于其中與抗逆相關的基因及其分子機制還不清楚，也尚未見密羅木中抗逆WRKY轉錄因子及其應用的相關報道。

發明內容

針對現有技術中的上述不足，本發明提供一種密羅木基因MfWRKY70及其應用，該基因能在干旱脫水早期快速響應，提高植物的抗旱耐鹽性能。

為實現上述目的，本發明解決其技術問題所采用的技術方案是：

一種密羅木基因MfWRKY70，該基因的編碼序列如SEQ ID NO.1所示或SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列經取代、缺失和/或添加一個或多個核苷酸，且能編碼相同功能蛋白質的核苷酸序列。

其中，序列表SEQ ID NO.1從密羅木葉片RNA中通過PCR克隆，全長885bp。

采用上述基因編碼的蛋白質，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示或SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列經取代、缺失和/或添加一個或多個氨基酸，且表達相同功能蛋白質的氨基酸序列。

其中，SEQ ID NO.2由294個氨基酸組成，有一個核定位信號：RRGCYKRRRTTETW；其含有一個WRKY保守結構域，位于127～182個氨基酸的位置，并且還含有一個典型C2HC型鋅指結構，為第三類WRKY轉錄因子家族。

包含上述密羅木MfWRKY70基因的質粒。

包含上述密羅木MfWRKY70基因的重組表達載體。

包含上述密羅木MfWRKY70基因的轉基因細胞系。

包含上述密羅木MfWRKY70基因的工程菌。

密羅木基因MfWRKY70在植物抗旱耐鹽過程中的應用。

本發明的有益效果為：

1.獲得了對干旱及鹽脅迫有較高耐受性的轉基因擬南芥。