[發明專利]藍萼甲素-生物素類小分子探針及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010044612.6
• 申請日: 2020-01-16
• 公開（公告）號: CN111187279A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 白素平;樊高省;張濤;李念先;劉兆敏;馬雯
• 申請（專利權）人: 新鄉醫學院
• 主分類號: C07D495/04
• 分類號: C07D495/04;A61P35/00;A61K31/4192;A61K49/00
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

1.一種藍萼甲素衍生物的小分子探針，其特征在于，具有通式I所示結構：

n＝1,2,3；R＝H，OH。

2.如權利要求1所述的藍萼甲素衍生物的小分子探針，其特征在于，選自如下化合物：

3.制備如權利要求1所述的藍萼甲素小分子探針的方法，其特征在于，包括以下步驟：

n＝1,2,3；R＝H，OH；

(1)將藍萼甲素與具有式1結構的炔丙基取代苯甲醛類化合物溶于有機溶劑中，攪拌使之溶解，然后再滴加濃硫酸，室溫反應，反應結束后，萃取，有機相經洗滌后，干燥，過濾，減壓濃縮；粗產品經硅膠柱層析純化，經洗脫劑洗脫，得藍萼甲素末端炔基的縮醛衍生物3；

(2)將藍萼甲素末端炔基的縮醛衍生物3與具有式4結構的生物素報告基團(biotin-PEG-N₃)溶于有機溶劑，攪拌使全部溶解后，冰浴條件下反應，再加入催化劑反應，撤走冰水浴，繼續室溫條件下反應；反應結束后萃取，有機相經洗滌，干燥，過濾之后旋干減壓濃縮，柱層析分離純化，洗脫，得目標物；

步驟(1)、(2)中，所述有機溶劑為THF、CH₂Cl₂、DMF、DMSO中的一種；

步驟(2)中，所述催化劑采用如下方法配制而成：無水硫酸銅粉末用水溶解，L-抗壞血酸鈉用水溶解，BPDS(水合紅菲繞啉二磺酸鈉)用水/DMF溶解，將前兩者混合均勻，取一半量加入BPDS中混勻。

4.合成通式I藍萼甲素小分子探針的中間體biotin-PEG-N₃生物素報告基團的方法，其特征在于，通過如下方法實現：

(1)聚乙二醇與對甲苯磺酰氯或甲磺酰氯溶于有機溶劑，冰浴，堿性條件發生取代反應，反應結束后有機溶劑萃取，干燥、過濾、濃縮得到兩端磺酰基取代中間體1；所述堿選用氫氧化鉀、氫氧化鈉、碳酸鉀、碳酸鈉、吡啶、三乙胺、DMAP、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉中的一種或幾種；所述有機溶劑選N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二甲基亞砜、二氯甲烷、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、石油醚、二氧六環、乙醇中的一種或幾種；

(2)中間體1與疊氮鈉溶于有機溶劑，加熱發生取代反應，反應結束后用有機溶劑萃取，干燥、過濾、濃縮得到化合物2；

所述有機溶劑選N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二甲基亞砜、二氯甲烷、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、石油醚、二氧六環、乙醇中的一種或幾種；

(3)化合物2與還原劑溶于有機溶劑，酸性條件，惰性氣體氣氛下發生還原反應；反應結束后，用有機溶劑萃取，干燥、過濾、濃縮得到化合物3；所述還原劑選自三苯基磷、氫氣/鈀碳、硼氫化鈉、四丁基硼氫化銨、氫化鋁鋰、二甲氨基硼烷中的一種或者幾種；

(4)化合物3與生物素biotin溶于有機溶劑，室溫反應過夜，旋干溶劑，柱層析得到化合物4；所述有機溶劑為N，N-二甲基甲酰胺、四氫呋喃、二甲基亞砜、二氯甲烷、甲醇、乙腈、乙酸乙酯、石油醚、二氧六環、乙醚、乙醇中的一種或兩種。

5.權利要求1或2所述的藍萼甲素分子探針的應用，其特征在于，將其作為抗腫瘤藥物藍萼甲素的分子探針。