[發(fā)明專利]一種分泌抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體雜交瘤細胞株1D4及單克隆抗體和應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010044012.X
• 申請日: 2020-01-15
• 公開（公告）號: CN111117969B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發(fā)明（設計）人: 張煉輝;王建和;吳曉妍;周筱帆;陳群一
• 申請（專利權）人: 華南農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C12N5/20
• 分類號: C12N5/20;C07K16/12;A01N47/44;A01P1/00;G01N33/577;G01N33/569
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發(fā)明公開了一種分泌抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體雜交瘤細胞株1D4及單克隆抗體和應用，所述雜交瘤細胞株1D4于2019年11月26日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC，保藏編號為CCTCC NO：C2019295，其分泌的抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4。本發(fā)明提供的雜交瘤細胞株1D4分泌的抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4能夠識別柑橘黃龍病菌轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2，通過免疫印跡反應證明單克隆抗體mAb 1D4可以特異地識別病原菌CLas的轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2。該單克隆抗體mAb 1D4可用于制備抑制或控制柑橘黃龍病的制劑、藥物，從而實現(xiàn)防治柑橘黃龍病，具有很好的推廣應用前景。

技術領域

本發(fā)明涉及細胞免疫技術領域，具體地，涉及一種分泌抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2 單克隆抗體雜交瘤細胞株1D4及單克隆抗體和應用。

背景技術

柑桔黃龍病是一種毀滅性的柑桔病害，在全世界范圍內(nèi)造成巨大的經(jīng)濟損失。柑桔植株感染黃龍病之后，葉片萎縮掉落，結實率下降，果實偏小，顏色黃綠不均，最終導致植株死亡，且柑桔黃龍病傳播性極強，短期內(nèi)可蔓延整個果園。柑桔黃龍病的病原菌是革蘭氏陰性細菌，其具有三種致病變種，分別為亞洲種C andidatus Liberibacter asiaticus(CLas)、非洲種Candidatus Liberibacter africa nus(CLaf)、美洲種CandidatusLiberibacter americanus(Clam)。目前針對柑桔黃龍病尚無有效的治療措施和理想的抗性品種，因此開發(fā)高效的黃龍病防治方法，控制黃龍病、及降低黃龍病的發(fā)生是當前應對黃龍病的主要方向。

目前并無有效阻斷柑桔黃龍病的方法，單克隆抗體在植物病原菌中的應用起步較早，其試材的同質(zhì)性和均一特異性的優(yōu)點，為植物病原細菌學中細菌種、小種或系統(tǒng)特異抗體的制作開辟了道路，不僅替代了病害診斷和細菌檢出中的多克隆抗體，而且有希望應用于細菌的生理生化及控制研究中。因此，研發(fā)能阻斷黃龍病病原菌轉(zhuǎn)運蛋白轉(zhuǎn)運功能的單克隆抗體，可用于開發(fā)的黃龍病檢測試紙，有利于控制黃龍病的發(fā)生和蔓延。目前有相關專利CN201810132721.6、CN201810 132890.X分別報道過針對CLas McAb2、McAb1膜表面蛋白，設計了雜交瘤細胞株并得到其單克隆抗體。但柑橘黃龍病菌的外轉(zhuǎn)運蛋白有很多種，以哪種外轉(zhuǎn)運蛋白作為抗原制作單克隆抗體檢測或阻斷柑橘黃龍病菌的效果最好未見報道，且目前還尚未有針對柑橘黃龍病病菌亞洲種(CLas)轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2(WP_01582 4909.1)的單克隆抗體方面的研究報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種分泌抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白 Ctp2單克隆抗體雜交瘤細胞株1D4及單克隆抗體和應用。

本發(fā)明的第一個目的是提供一種分泌抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體的雜交瘤細胞株1D4，所述雜交瘤細胞株1D4于2019年11月26日保藏在中國典型培養(yǎng)物保藏中心CCTCC（中國武漢武漢大學），保藏編號為CCTCC NO：C2019295。

本發(fā)明的第二個目的是提供所述的雜交瘤細胞株1D4分泌的抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4。

本發(fā)明的第三個目的是提供所述雜交瘤細胞株1D4和/或所述抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4在制備抑制柑橘黃龍病菌CLas的制劑和/或藥物中的應用。

本發(fā)明的第四個目的是提供所述雜交瘤細胞株1D4和/或所述抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4在制備防治柑橘黃龍病菌CLas的制劑和/或藥物的應用。

本發(fā)明的第五個目的是提供所述雜交瘤細胞株1D4和/或所述抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4在制備柑橘黃龍病檢測藥物、制劑和/或試劑盒中的應用。

本發(fā)明的第六個目的是提供一種抑制柑橘黃龍病菌CLas的制劑和/或藥物，其特征在于，包括所述抗CLas轉(zhuǎn)運蛋白Ctp2單克隆抗體mAb 1D4。