[發明專利]一種文蛤鮮味肽及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 202010041490.5
• 申請日: 2020-01-15
• 公開（公告）號: CN111184124A
• 公開（公告）日: 2020-05-22
• 發明（設計）人: 李學鵬;勵建榮;王金廂;謝曉霞;儀淑敏;李婷婷;徐永霞;朱文慧;米紅波;郭曉華;牟偉麗;于建洋
• 申請（專利權）人: 渤海大學
• 主分類號: A23J3/04
• 分類號: A23J3/04;A23J1/04;A23L27/21;A23L27/23;A23L27/26;A23L33/18;A23L23/10;A23L27/50
• 代理公司: 北京金智普華知識產權代理有限公司 11401
• 代理人: 皋吉甫

1.一種文蛤鮮味肽，其特征在于，包含氨基酸序列為GLLPDGTPR、RPNPFENR、STMLLESER、ANPGPVRDLR、QVAIAHRDAK、VLPTDQNFILR、VTADESQQDVLK中的任意一種或幾種多肽。

2.根據權利要求1所述的文蛤鮮味肽，其特征在于，所述鮮味肽具有鮮味和咸味增強效果，其呈鮮閾值為0.125mg/mL。

3.根據權利要求1所述文蛤鮮味肽，其特征在于，所述鮮味肽基于分子模擬可以與鮮味受體T1R1/T1R3對接，主要結合位點為位于T1R3亞基上的氨基酸殘基Asp196、Glu128、His125、His368、Glu281和Arg34。

4.根據權利要求1所述一種文蛤鮮味肽，其特征在于，所述多肽的制備方法包括以下步驟：

(1)水煮液凍干粉的制備，將鮮活文蛤去殼取肉，洗凈瀝干水分后稱重，按比例加入去離子水勻漿，加熱煮制后濾布過濾，濾液離心后取上清液，冷凍干燥，得水煮液凍干粉；

(2)超濾分離，將上述水煮液凍干粉復溶于超純水中，配置成濃度為10mg/mL的溶液，過超濾膜，收集過濾液，冷凍干燥，得超濾液凍干粉；

(3)凝膠色譜純化，上述超濾液凍干粉用超純水復溶，制成濃度為10mg/mL溶液，上Sephadex G-15凝膠色譜柱，超純水洗脫，收集第5峰組分F5，冷凍干燥，得F5凍干粉；

(4)RP-HPLC純化，將上述F5凍干粉溶于超純水，制成濃度10mg/mL溶液，進一步用反相高效液相色譜分離純化，收集第1個主峰組分F5-Ⅰ，冷凍干燥，得文蛤鮮味肽凍干粉。

5.根據權利要求4所述文蛤鮮味肽的制備方法，其特征在于，步驟(1)中文蛤肉與去離子水的比例為1:3(w/v)；煮制時中心溫度達到95～100℃后保持20～30min；采用5000r/min的轉速對水煮液離心20～30min。

6.根據權利要求4所述文蛤鮮味肽的制備方法，其特征在于，步驟(2)中所述超濾膜截留分子量為3000Da，在4℃低溫下進行超濾分離。

7.根據權利要求4所述文蛤鮮味肽的制備方法，其特征在于，步驟(3)中所述SephadexG-15凝膠色譜柱，洗脫條件為：上樣量2mL，流速1mL/min，紫外檢測波長220nm。

8.根據權利要求4所述文蛤鮮味肽的制備方法，其特征在于，步驟(4)中所述將F5凍干粉進一步用反相高效液相色譜分離純化，色譜條件為：色譜柱YMC-Pack ODS-AQ C18(250×10mm，5μm)，流速1mL/min，檢測波長220nm，上樣量100μL，流動相：A：乙腈(0.05％TFA)，B：超純水(0.05％TFA)，等度洗脫：10％A，90％B，洗脫時間40min。

9.權利要求1所述文蛤鮮味肽在制備調味品、食品及保健品中的應用。

10.根據權利要求9所述的調味品，其特征在于，所述調味品包括味精、雞精、雞粉、醬油、湯塊。