[發明專利]一種長非編碼RNA及其在診斷/治療子癇前期中的應用

在審

• 申請號: 202010041092.3
• 申請日: 2020-01-15
• 公開（公告）號: CN111172161A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 許葉濤;夏曦;張媛媛;湯衛春
• 申請（專利權）人: 江蘇省人民醫院（南京醫科大學第一附屬醫院）
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/6883;A61K31/7088;A61P15/00
• 代理公司: 北京輕創知識產權代理有限公司 11212
• 代理人: 王佳妹

本發明屬于基因工程領域，特別涉及PDIA3P1在制備診斷子癇前期及靶點藥物治療中的應用；在子癇前期孕婦胎盤組織中PDIA3P1的下調與子癇前期的發生發展有關，低表達水平的PDIA3P1與子癇前期發病機制有著密切的關系，通過改變PDIA3P1的表達對子癇前期孕婦滋養細胞的增殖、凋亡、侵襲、遷移等產生影響，增強PDIA3P1表達能夠促進滋養細胞增殖、侵襲和遷移。

技術領域

本發明屬于基因工程領域，特別涉及長非編碼RNA-PDIA3P1在診斷及制備治療子癇前期藥物的應用。

背景技術

子癇前期是全球最常見妊娠期合并癥之一，是妊娠期并發癥相關死亡的主要原因，世界衛生組織統計報道表明，子癇前期或者子癇直接導致全球每年約14%(約8500)的孕產婦死亡，其是胎兒早產和胎兒生長受限以及孕產婦死亡最常見的原因之一。盡管目前內科治療得到了長足的發展，但病人總體發生率依然較高。隨著測序技術和分子生物學的快速發展，基因診斷和分子靶向治療成為子癇前期治療中一個熱點問題。因此，研究參與子癇前期的發生發展和轉移的的分子機制，對制定特定的診斷方法和個性化的治療策略至關重要。

過去的十年里，基于快速出現的高通量測序的基因表達分析技術和生物信息學推動了大規模的人類基因組學的研究，進而發現了非編碼RNAs。人類基因組中只有2%的編碼轉錄成蛋白，而絕大多數轉錄成非編碼RNAs，包括小分子核糖核酸、長非編碼RNA(lncRNAs)和假基因。最近，miRNA在細胞進程的各個方面的作用已經得到證實，然而，lncRNAs的功能研究不是很透徹。ENCODE計劃中GENECODE研究組新數據顯示有成千上萬的lncRNAs，但只有其中的一些有生物學功能。有趣的是，這些lncRNAs通過染色質重塑參與調控多種細胞進程，包括重組干細胞多能性，父母的印記和腫瘤細胞的擴散和轉移以及表觀遺傳修飾和吸附miRNAs。

最近，大量的研究顯示，異常lncRNAs表達發揮不同的生物學機制參與多種人類疾病發生。例如，lncRNA?ROR可通過抑制甲基轉移酶G9A，促進TESC的啟動子區H3K9去甲基化參與腫瘤發生。同時，AOC4P通過與波形蛋白綁定和促進其降解，抑制上皮間質轉化（EMT）從而抑制肝細胞癌轉移。此外，上調的SPRY4-IT1通過與HUR綁定，抑制子癇前期滋養細胞增殖，遷移和血管形成能力。這些發現表明lncRNAs在人類疾病尤其是子癇前期的發生發展過程中扮演至關重要的角色。因此，發現更多的子癇前期相關的lncRNAs并研究他們的生物功能和機制，對更好地理解子癇前期發生發展的的分子生物學有重要的意義。

PDIA3P1是一條長度為2099nt的lncRNA，其序列如序列1所示，其位于人類染色體1q21.1。我們發現PDIA3P1在子癇前期孕婦胎盤組織中較正常孕婦胎盤中表達量下調。在過表達或敲除PDIA3P1后，研究了PDIA3P1在子癇前期發生和發展的作用并研究了PDIA3P1在子癇前期孕婦滋養細胞中的相關靶基因的功能。

發明內容

本發明的目的是提供PDIA3P1在診斷子癇前期及在制備治療子癇前期藥物中的應用。

本發明涉及一種長鏈非編碼RNA，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO:?1所示。

一種長鏈非編碼RNA在制備治療子癇前期藥物中的應用；

一種長非編碼RNA在制備診斷子癇前期試劑中的應用；

一種檢測RP11-7K24.3的引物，即：SEQ?ID?NO:?2?R?PDIA3P1?FATGGGCCTGTGAAGGTAGTG，SEQ?ID?NO:?3：PDIA3P1?R?GTGGCATCCATCTTGGCTAT；

一種干擾RP11-7K24.3的siRNA，即：SEQ?ID?NO:?4?si-?PDIA3P1?1#CATTAGTGATAAAGATGCCTCTATA，SEQ?ID?NO:?5?si-?PDIA3P1?2#GATAACGGAGATGGTATCATCTTAT；