[發明專利]曲霉WBX-38及其在生產環匹阿尼酸中的應用

有效

• 申請號: 202010037509.9
• 申請日: 2020-01-14
• 公開（公告）號: CN111139189B
• 公開（公告）日: 2022-04-19
• 發明（設計）人: 王鴻;岳少鵬;陳建偉;咼瑜琪
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/20;C12P39/00;C12P17/18;C07D487/06;C12R1/66;C12R1/01
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發明公開了一種曲霉WBX?38及其在生產環匹阿尼酸中的應用，將曲霉WBX?38和肺冢村氏菌TP?B0596分別進行發酵培養，將發酵液混合，在25?32℃、160?200rpm條件下共培養5?8d，將共培養液分離純化，獲得環匹阿尼酸。本發明曲霉WBX?38與肺冢村氏菌TP?B0596共培養，制備得到環匹阿尼酸化合物，產量為20mg/L。

技術領域

本發明涉及一種環匹阿尼酸的制備方法，特別涉及一種海洋來源曲霉(Aspergillus sp.)WBX-38與細菌(Tsukamurellapulmonis)TP-B0596共培養生產環匹阿尼酸(cyclopiazonic acid)的方法，本發明屬于微生物發酵技術領域。

背景技術

自然界可以生產大量新穎和不尋常的分子骨架，其創造力是無與倫比的。在天然產物中，微生物次級代謝產物又是一個非常重要的組成部分，相當數量的天然產物藥物或其先導物都是由微生物或微生物與宿主的相互作用產生的。開啟抗生素時代的青霉素，后續的大環內酯類抗生素紅霉素，都是由微生物生產的。但近些年，隨著研究的深入，在微生物次級代謝產物中發現眾多具有價值的化合物的同時，篩選獲得的微生物資源的重復率不斷上升，發現具有新結構、新活性化合物的幾率逐年下降。

在實驗室培養條件下，微生物的次級代謝產物產生途徑不被表達或抑制。針對這一困境，科學研究者們提出了一系列的解決方案，其中一種策略就是共培養，模擬自然環境中微生物之間，微生物與環境之間的相互作用，促進微生物生長。在自然界中，不同的微生物群形成了復雜的微生物群落。因此，科學工作者們普遍認為，相較于純培養，共培養可以更有效地產生次生代謝產物，因為兩種不同的微生物共培養能夠更好地模擬自然環境中微生物之間的不斷相互作用。

發明內容

本發明的目的是提供一株新菌株--海洋曲霉WBX-38，以及利用海洋來源曲霉WBX-38與細菌TP-B0596共同發酵培養在生產環匹阿尼酸(cyclopiazonic acid)中的應用，解決了環匹阿尼酸化合物生產的需求問題。

本發明采用的技術方案是：

本發明提供一株新菌株，曲霉(Aspergillus sp.)WBX-38，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為：GDMCCNo：3.676，保藏日期為：2019年12月13日，地址廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓廣東省微生物研究所，郵編510070。

本發明還提供一種所述曲霉WBX-38在生產環匹阿尼酸(cyclopiazonic acid)中的應用，所述的應用方法為：將曲霉WBX-38和肺冢村氏菌(Tsukamurellapulmonis)TP-B0596分別進行發酵培養，將發酵液混合，在25-32℃、160-200rpm條件下共培養5-8d，將共培養液分離純化，獲得環匹阿尼酸。

進一步，所述曲霉WBX-38發酵培養條件為：將曲霉WBX-38接種至PDB培養基中，在25-32℃、160-200rpm條件下振蕩培養1-3d(優選30℃、180rpm培養2d)，獲得曲霉WBX-38發酵液；所述PDB培養基組成：200g/L馬鈴薯，20g/L葡萄糖，溶劑為水，pH自然。

進一步，所述肺冢村氏菌TP-B0596發酵培養條件為：將肺冢村氏菌TP-B0596接種至細菌培養基，在25-32℃、160-200rpm條件下振蕩培養1-3d(優選30℃、180rpm培養2d)，獲得肺冢村氏菌TP-B0596發酵液；所述細菌培養基組成為：20g/L淀粉、20g/L甘油、5g/L葡萄糖、15g/L酪蛋白胨、3g/L酵母提取物，溶劑為水，pH自然。

進一步，所述曲霉WBX-38在發酵前先接種至PDA培養基，30℃培養5d，得到曲霉WBX-38菌株平板，再將曲霉WBX-38菌株平板接種至PDB培養基進行發酵；PDA平板培養基組成：馬鈴薯200g/L，葡萄糖20g/L，瓊脂20g/L，溶劑為水，pH自然。