[發明專利]4-脲基-5-羧基咪唑酰胺水解酶及其用途

在審

• 申請號: 202010036519.0
• 申請日: 2020-01-14
• 公開（公告）號: CN113186180A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: 張雁;李佩珊;仝楊;胡逸靈;劉大志
• 申請（專利權）人: 天津大學
• 主分類號: C12N9/80
• 分類號: C12N9/80;C12N15/55;A61K38/50;A61P19/06;A23L33/18
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司 11204
• 代理人: 王達佐;洪欣

1.多肽A，其包含SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或其功能變體，其中所述功能變體具有4-脲基-5-羧基咪唑酰胺水解酶活性。

2.如權利要求1所述的多肽A，其在空間構象上具有如下定義的催化部位A：

所述催化部位A包含空間構象上相互靠近的催化三聯體；

任選地，所述催化三聯體由參照SEQ ID NO:1的C134、D10、K101組成。

3.如權利要求2所述的多肽A，其中所述催化部位A還包含二價金屬離子，任選地1個二價金屬離子(例如Zn²⁺或Mn²⁺)。

4.如權利要求3所述的多肽A，其中所述催化部位A還包含與所述金屬離子配位的四個氨基酸殘基，例如H61、H74、E59和D67。

5.如權利要求1-3中任一項所述的多肽A，其還包含在空間構象上具有如下定義的結合部位A：

所述結合部位A包含在空間構象上相互靠近的、參照SEQ ID NO:1的F15、R71、V129、H104和W130氨基酸殘基。

6.如權利要求5所述的多肽A，其中所述催化部位A與所述結合部位A相距不大于5埃

7.如權利要求1-6中任一項所述的多肽A，其中所述功能變體為SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的天然同工酶；

優選地，所述天然同工酶來自：柱胞梭菌(Clostridium cylindrosporum)、產乙酸互營單包菌(Sporanaerobacter acetigenes)、解脂嗜熱互營桿菌(Thermosyntrophalipolytica)、米氏解硫胺素芽孢桿菌(Aneurinibacillus migulanus)、厭氧砷還原菌(Alkaliphilus oremlandii)、Fictibacillus enclensis、芽孢桿菌(Bacillus sp.)、Bacillus mesonae、海泥芽孢桿菌(Bacillus oceanisediminis)、堅強芽孢桿菌(Bacillusfirmus)、Marinisporobacter balticus、Alkaliphilus peptidifermentans、雙岐高溫黃色微球菌(Thermoflavimicrobium dichotomicum)、類芽孢桿菌(Paenibacillus sp.)、溫鐵還原細菌(Caloranaerobacter sp.)、Virgibacillus profundi、Carboxydothermusislandicus、Natronincola peptidivorans、Natronincola peptidivorans、香蒲類芽孢桿菌(Paenibacillus typhae)、Natribacillus halophilus、Caloramator australicus、產氫羧基嗜熱菌(Carbydothermus hydrogenoformans)、Paraclostridium benzoelyticum、Gottschalkia acidurici、Bacillus notoginsengisoli、Romboutsia lituseburensis、Carboxydothermus pertinax、產氫氨基酸桿菌(Acidaminobacter hydrogenoformans)、非解糖卟啉單胞菌(Soehngenia saccharolytica)、加利福尼亞丁達爾氏菌(Tindalliacaliforniensis)、Sulfobacillus benefaciens、Bacillus solani、梭菌(Clostridiumsp.)、Caloramator mitchellensis、Sporosarcina globispora、Paraclostridiumbifermentans、Proteiniborus sp.、Maledivibacter halophilus、Tepidimicrobiumxylanilyticum、組織菌(Tissierella sp.)、Andreesenia angusta、極尖組織菌(Tissierella praeacuta)、嗜氨菌(Ammoniphilus sp.)、耐鹽海洋絲狀菌(Marininemahalotolerans)、中溫海洋絲狀菌(Marininema mesophilum)、梭菌科細菌(Clostridiaceaebacterium)、堆肥宏基因組(compost metagenome)、Thermotalea metallivorans、Caloramator fervidus、Paludifilum halophilum、強壯芽孢桿菌(Bacillus fortis)、虛構芽孢桿菌(Fictibacillus sp.)、土地芽孢桿菌(Bacillus terrae)、Tissierellacreatinini、Virgibacillus indicus、Bacillus praedii、Fictibacillus solisalsi、不動桿菌(Acinetobacter sp.)、Anaerovirgula multivorans、嗜堿菌(Alkaliphilus sp.)、Paenibacillus donghaensis、北擬桿菌(Paenibacillus borealis)、Thermohalobacterberrensis、Tindallia magadiensis、Ornithinibacillus halophilus、Soehngenia sp.、Proteiniborus ethanoligenes、Anaeromicrobium sediminis、Bacillusfreudenreichii、Alkaliphilus metalliredigens、高溫黃色微球菌(Thermoflavimicrobium sp.)、擬桿菌(Bacteroidetes bacterium)、Gottschalkiapurinilytica、芽孢桿菌屬(Bacillus bacterium)和Paraclostridium bifermentans；

更優選地，所述天然同工酶包含SEQ ID NO:2-102中任一項所示的氨基酸序列。