[發(fā)明專利]一種防治生姜莖基腐病的微生物菌劑及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010036196.5
• 申請(qǐng)日: 2020-01-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111172072B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 薛雅蓉;左廣勝;劉常宏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京大學(xué);北京中龍創(chuàng)科技有限公司
• 主分類號(hào): C12N1/20
• 分類號(hào): C12N1/20;A01N63/22;A01P3/00;A01P21/00;C12R1/07
• 代理公司: 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 鄒仕娟

本發(fā)明屬于微生物菌劑制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其為一種防治生姜莖基腐病的微生物菌劑及其制備方法與應(yīng)用，其中，其菌劑包括：芽孢桿菌CC09菌株發(fā)酵液12?30％，腐殖酸鉀30?40％，黃腐酸鉀30?40％，復(fù)合微生物菌吸附劑粉料5?10％，羧甲基纖維素0.1?0.3％，亞甲基雙萘磺酸鈉(NNO)0.1?0.3％，其中芽孢桿菌CC09菌株發(fā)酵液中，有效活菌數(shù)≥10億/mL。經(jīng)試驗(yàn)表明，本發(fā)明可有效防治生姜莖基腐病并促進(jìn)生姜生長(zhǎng)，極大提高生姜的產(chǎn)量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物菌劑制備技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種防治生姜莖基腐病的微生物菌劑及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)

生姜(Zingiber officinale Roscoe)是姜科、姜屬的多年生草本植物，也是重要的藥食兩用經(jīng)濟(jì)類蔬菜作物，在亞洲、非洲、南美等地區(qū)都有栽培。我國(guó)是生姜主產(chǎn)國(guó)之一，主產(chǎn)區(qū)在山東、河南、四川、云南等省份，是種植區(qū)農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)的支柱作物，并且具有很高的出口創(chuàng)匯價(jià)值。但因生姜莖基腐病等的連年發(fā)生，嚴(yán)重影響了生姜的產(chǎn)量和品質(zhì)，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。

引起生姜莖基腐的原因極其復(fù)雜，已報(bào)道的病原菌有細(xì)菌青枯菌(Ralstoniasolanacearum)、歐文氏菌(Erwinia spp.)和短小芽胞桿菌(Bacillus pumilus)以及真菌群結(jié)腐霉菌(Pythium myriotylum)和尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)。但各地報(bào)道不一，并且時(shí)有新病原菌被發(fā)現(xiàn)。其中，由尖孢鐮刀菌引起的莖基腐病是影響生姜產(chǎn)量和品質(zhì)的最嚴(yán)重病害之一。

針對(duì)土壤和病姜均可帶菌的特點(diǎn)，目前應(yīng)用于生姜莖基腐病防治的方法主要有：(1)選擇健姜，與豆科作物、糧食作物玉米、小麥或百合科蔥蒜輪作；(2)用氯化苦等熏蒸土壤；(3)用噁霉靈、可殺得等化學(xué)農(nóng)藥浸種、灌根和噴施處理；(4)芽孢桿菌(Bacillus spp.)和類芽孢桿菌屬(Peanibacillus spp.)等生防菌劑的應(yīng)用。鑒于輪作難度較大，化學(xué)農(nóng)藥存在殘留和環(huán)境污染風(fēng)險(xiǎn)，目前，人們普遍認(rèn)為生防菌劑是理想的、環(huán)境友好型生姜莖基腐病防治產(chǎn)品。然而，當(dāng)前能夠有效控制生姜莖基腐病的生防菌劑產(chǎn)品十分有限，且防病效果不穩(wěn)定，增產(chǎn)結(jié)果不顯著。因此，急需尋找一種高效防病的微生物菌劑，用于生姜的健康栽培和增產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有生姜莖基腐病防治技術(shù)的缺點(diǎn)，提出一種防治生姜莖基腐病的微生物菌劑及其制備方法與應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術(shù)方案：

一種防治生姜莖基腐病的微生物菌劑，包括以下重量份的原料：芽孢桿菌CC09菌株發(fā)酵液12-30％，腐殖酸鉀30-40％，黃腐酸鉀30-40％，復(fù)合微生物菌吸附劑粉料5-10％，羧甲基纖維素0.1-0.3％，亞甲基雙萘磺酸鈉(NNO)0.1-0.3％。

優(yōu)選的，芽孢桿菌CC09菌株發(fā)酵液中，有效活菌數(shù)≥10億/mL。

本發(fā)明還提出了一種防治生姜莖基腐病的微生物菌劑的制備方法，包括以下步驟：

S1、一級(jí)種子液的制備：將菌種CC09菌株接種于含50ml改良LB培養(yǎng)基的200ml三角瓶中，于37℃、160rpm搖床培養(yǎng)12小時(shí)；

S2、二級(jí)種子液的制備：取6ml一級(jí)種子液，接種于含600ml的改良LB培養(yǎng)基的1L三角瓶中，于37℃、160rpm搖床培養(yǎng)12小時(shí)；

S3、發(fā)酵培養(yǎng)：取二級(jí)種子液，按5％的接種量(3.5L)接種于含70L改良LB培養(yǎng)基的100L發(fā)酵罐中，于37℃和150rpm發(fā)酵48h，制得芽孢桿菌CC09菌株發(fā)酵液；

S4、混合：將步驟S3中制得的芽孢桿菌CC09菌株發(fā)酵液12-30％，腐殖酸鉀30-40％，黃腐酸鉀30-40％，復(fù)合微生物菌吸附劑粉料5-10％，羧甲基纖維素0.1-0.3％，亞甲基雙萘磺酸鈉(NNO)0.1-0.3％進(jìn)行混勻處理，得到微生物菌劑。