[發明專利]志賀氏菌的快速恒溫檢測方法、引物組及試劑盒

有效

• 申請號: 202010036148.6
• 申請日: 2016-08-30
• 公開（公告）號: CN111020048B
• 公開（公告）日: 2023-03-10
• 發明（設計）人: 劉偉;李亦學;李園園;李雪玲;韋朝春;賈犇;陸長德;陸曉婷;曹永梅
• 申請（專利權）人: 上海產業技術研究院;上海旺旺食品集團有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/01
• 代理公司: 上海麥其知識產權代理事務所(普通合伙) 31257
• 代理人: 董紅曼

1.一種針對志賀氏菌的快速恒溫檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括能擴增志賀氏菌基因組特異性堿基序列的引物組；其中，所述能擴增志賀氏菌基因組特異性堿基序列的引物組為引物組A或引物組A’；

引物組A：

上游外引物F3_A：5’-AGTCAGTCTGGATATGGGCC-3’(SEQ ID NO：1)；

下游外引物B3_A：5’-AAGAGTGATTTCCTGGCCTG-3’(SEQ ID NO：2)；

上游內引物FIP_A：5’-ACGCCCTGAGACAACAGAACCGGGTGTGATAAATGGGGCC-3’(SEQ ID NO：3)；

下游內引物BIP_A：5’-GGATGCTGAGCACCCCTTCAAACGTGAATATTCCGTTGCTGGC-3’(SEQ IDNO：4)；

引物組A’：

上游外引物F3_A：5’-AGTCAGTCTGGATATGGGCC-3’；

下游外引物B3_A：5’-AAGAGTGATTTCCTGGCCTG-3’；

上游內引物FIP_A：5’-ACGCCCTGAGACAACAGAACCGGGTGTGATAAATGGGGCC-3’；下游內引物BIP_A：

5’-GGATGCTGAGCACCCCTTCAAACGTGAATATTCCGTTGCTGGC-3’；

下游環引物LB_A：5’-GTGTGTCGGGTATGATGATGCCG-3’(SEQ ID NO：9)。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，其還包括BstDNA聚合酶反應緩沖液、BstDNA聚合酶、dNTP溶液、Mg²⁺、甜菜堿中的一種或多種。

3.如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒的酶反應體系包括：1×BstDNA聚合酶反應緩沖液，2-9mmol/LMg²⁺，1.0-1.6mmol/LdNTP，0.8-2.0μmol/L的FIP_A和BIP_A引物，0.15-0.3μmol/L的F3_A和B3_A引物，包括或不包括0.4-1.0μmol/L的LB_A引物，0.16-0.64U/μLBstDNA聚合酶，和0-1.5mol/L的甜菜堿。

4.如權利要求1～3之任一項所述的試劑盒在非診斷目的的恒溫檢測志賀氏菌中的應用。