[發(fā)明專利]一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010032047.1
• 申請日: 2020-01-13
• 公開（公告）號: CN113106054B
• 公開（公告）日: 2022-10-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張炳強(qiáng);陳夢夢;李翠翠;王二樸;王福斌;鄒偉;付學(xué)奇;劉翠娟
• 申請（專利權(quán)）人: 青島瑞思德生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
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• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑。一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑，由以下組分組成：GLP?1、甲狀旁腺激素、對乙酰氨基酚、雷帕霉素、淫羊藿苷、曲美替尼、EPO和VEGF。本發(fā)明的一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑，各成分均安全無毒性，誘導(dǎo)分化所需步驟少、時間短，誘導(dǎo)效率高。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑。

背景技術(shù)

糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一種以糖脂代謝紊亂為主要特征的內(nèi)分泌代謝性疾病。根據(jù)世界衛(wèi)生組織和國際糖尿病聯(lián)盟公布的預(yù)測，到2030年，全球糖尿病患者將達(dá)3.7億。目前我國DM患者已超過4500萬，僅次于印度居第二位。盡管其病因不同，但都表現(xiàn)為胰島細(xì)胞數(shù)量及功能的缺陷，最終都需要使用胰島素進(jìn)行治療。盡管由于胰島素的應(yīng)用，尤其是近年來在胰島素劑型以及給藥途徑等方面均取得了一些進(jìn)展，但實踐證明外源性胰島素并不能像人體自身分泌胰島素那樣完美地控制血糖并恒定維持血糖正常。細(xì)胞替代療法是治療糖尿病的重要方法，是一種更接近生理方式的有效方法，可實現(xiàn)對血糖進(jìn)行持續(xù)監(jiān)測和精細(xì)調(diào)節(jié)。近些年，經(jīng)肝門靜脈植入胰島細(xì)胞治療糖尿病也獲得了一些療效，但胰島細(xì)胞移植面臨著兩個難題：供體來源不足及嚴(yán)重的免疫排斥反應(yīng)。

干細(xì)胞作為一種具有自我更新及多向分化的細(xì)胞，在一定條件下可分化為具有功能性的胰島細(xì)胞，因此可作為胰島細(xì)胞的全新來源。目前由干細(xì)胞分化獲得胰島細(xì)胞有三種途徑：1、胚胎干細(xì)胞分化；2、胰島干細(xì)胞或胰島前體細(xì)胞分化；3、成體干細(xì)胞分化。由于胚胎干細(xì)胞具有倫理爭議，且很難獲得胰島干細(xì)胞，而成體干細(xì)胞來源廣泛，無倫理爭議，可作為胰島細(xì)胞的來源。

目前的干細(xì)胞誘導(dǎo)方式主要有體外誘導(dǎo)、基因修飾、蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)與組織微環(huán)境誘導(dǎo)，其中體外誘導(dǎo)是采用不同刺激因子組合，將干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為目的細(xì)胞。各實驗室誘導(dǎo)分化條件各異，誘導(dǎo)分化機(jī)制尚不明確，誘導(dǎo)分化效率低，胰島分泌能力僅為正常胰島1%左右，且誘導(dǎo)過程復(fù)雜，誘導(dǎo)時間長，所得細(xì)胞數(shù)量少，功能低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，提供一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化成胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑，各成分均安全無毒性，誘導(dǎo)分化所需步驟少、時間短，誘導(dǎo)效率高。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑，由以下組分組成：GLP-1、甲狀旁腺激素、對乙酰氨基酚、雷帕霉素、淫羊藿苷、曲美替尼、EPO和VEGF。

所述誘導(dǎo)劑各組分的質(zhì)量濃度配比為：GLP-1 20-40mg/L、甲狀旁腺激素6-12mg/L、對乙酰氨基酚2-8mg/L、雷帕霉素2-8mg/L、淫羊藿苷2-8mg/L、曲美替尼0.3-0.6mg/L、EPO2-4ug/L、VEGF 2-4ug/L。

優(yōu)選的，所述誘導(dǎo)劑各組分的質(zhì)量濃度配比為：GLP-1 30mg/L、甲狀旁腺激素9mg/L、對乙酰氨基酚5mg/L、雷帕霉素5mg/L、淫羊藿苷5mg/L、曲美替尼0.4mg/L、EPO 3ug/L、VEGF 3ug/L。

本發(fā)明的一種將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞的誘導(dǎo)劑，具有以下優(yōu)勢：

1、無需基因轉(zhuǎn)染，故無基因改變和癌癥風(fēng)險；

2、誘導(dǎo)步驟少：當(dāng)前文獻(xiàn)報道的方法以兩步法或者三步法為主，采用本發(fā)明的誘導(dǎo)劑僅需要一步；

3、誘導(dǎo)時間短：當(dāng)前文獻(xiàn)一般誘導(dǎo)需要10天以上，采用本發(fā)明的誘導(dǎo)劑僅需要5天；

4、采用本發(fā)明的誘導(dǎo)劑將間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)成胰島細(xì)胞誘導(dǎo)分化效率高；

5、本發(fā)明的誘導(dǎo)劑，各成分均安全無毒性；

6、間充質(zhì)干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為胰島細(xì)胞后，移植后無排斥，無倫理問題，安全性高，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。