[發明專利]基于DNA步移和滾環擴增信號放大的電化學核酸檢測方法有效
| 申請號： | 202010029620.3 | 申請日： | 2020-01-13 |
| 公開（公告）號： | CN111172246B | 公開（公告）日： | 2022-10-28 |
| 發明（設計）人： | 繆鵬;柴華 | 申請（專利權）人： | 天津國科醫工科技發展有限公司;濟南國科醫工科技發展有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/6851 | 分類號： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 北京遠大卓悅知識產權代理有限公司 11369 | 代理人： | 楊勝 |
| 地址： | 300399*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基于 dna 擴增 信號 放大 電化學 核酸 檢測 方法 | ||
1.一種用于非疾病診斷和治療的核酸檢測方法，用于對待測樣品中的目標核酸進行定量檢測，其特征在于，包括：
1）設計兩個DNA四面體：DNA walker和DNA track；將該DNA walker和DNA track固定于電極表面；
2）在待測樣品中加入padlock探針，隨后將所述電極插入到待測樣品中孵育；向待測樣品中繼續加入DNA連接酶和DNA聚合酶，于37℃下反應；
3）從待測樣品中取出所述電極，將所述電極在室溫下浸入Pb2+中反應，最后再與銀納米顆粒孵育；
4）將所述電極作為工作電極，使用電化學工作站，采用三電極系統記錄線性伏安掃描曲線，通過檢測伏安電流信號的變化，計算出目標核酸的濃度；
所述DNA track由探針A1、探針B、探針C和探針D四條序列組裝而成；其中，
探針A1：NH2-AGTAAGGrATCACGGTTTTTTACATTCCTAAGTCTGAA ACATTACAGCTTGCTACACGAGAAGAGCCGCCATAGTA；
探針B：SH-TATCACCAGGCAGTTGACAGTGTAGCAAGCTGTAATAG ATGCGAGGGTCCAATAC；
探針C：SH-TCAACTGCCTGGTGATAAAACGACACTACGTGGGAATC TACTATGGCGGCTCTTC；
探針D：SH-TTCAGACTTAGGAATGTGCTTCCCACGTAGTGTCGTTT GTATTGGACCCTCGCAT；
所述DNA walker由探針A2、探針B、探針C和探針D四條序列組裝而成；其中，
探針A2：ACATTCCTAAGTCTGAAACATTACAGCTTGCTACACGAGA AGAGCCGCCATAGTATTTAGTAAGAGGCTCAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCGGCCGAGCCTCTTACT；
探針B：SH-TATCACCAGGCAGTTGACAGTGTAGCAAGCTGTAATAG ATGCGAGGGTCCAATAC；
探針C：SH-TCAACTGCCTGGTGATAAAACGACACTACGTGGGAATC TACTATGGCGGCTCTTC；
探針D：SH-TTCAGACTTAGGAATGTGCTTCCCACGTAGTGTCGTTT GTATTGGACCCTCGCAT；
所述padlock探針的序列為：GCTCGGCCAGCTTTCACGGAGTAAGAG。
2.根據權利要求1所述的核酸檢測方法，其特征在于，所述目標核酸的序列為：GCTAGAGATTTTCCACACTGACT。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于天津國科醫工科技發展有限公司;濟南國科醫工科技發展有限公司，未經天津國科醫工科技發展有限公司;濟南國科醫工科技發展有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202010029620.3/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
