[發明專利]固定化酶及其生產功能性低聚糖的方法

在審

• 申請號: 202010027186.5
• 申請日: 2020-01-10
• 公開（公告）號: CN111172145A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 曾憲維;謝志龍;楊新球;魏遠安;陳振鵬;戴健興;陳子健;伍劍鋒;浣金剛
• 申請（專利權）人: 量子高科（中國）生物股份有限公司
• 主分類號: C12N11/08
• 分類號: C12N11/08;C12P19/00;C12P19/04;C12P19/12
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 江側燕

1.一種固定化酶的方法，其特征在于，包括：將離子交換樹脂與酶液混合進行反應，生成固定化酶；其中，所述離子交換樹脂包含仲胺基、叔胺基或季銨基官能團。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述離子交換樹脂為大孔型樹脂，優選為苯乙烯系樹脂、酚醛樹脂。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述反應在電導3～20ms/cm條件下進行；優選地，所述反應在電導5～15ms/cm條件下進行。

4.根據權利要求1至3任一項所述的方法，其特征在于，所述反應時間為5～40h，溫度為6～35℃；優選反應時間為8～24h，溫度為8～25℃。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述離子交換樹脂與酶液按照1g：10～200U的比例進行混合；優選1g：60～150U。

6.根據權利要求1至5中任一項所述的固定化酶的方法，其特征在于，所述離子交換樹脂為活化后的離子交換樹脂，活化的方法為：強堿性樹脂用堿和酸依次浸泡，弱堿性樹脂直接用去離子水浸泡。

7.根據權利要求6所述的固定化酶的方法，其特征在于，對于官能團為季銨基的離子交換樹脂，其活化的方法為：依次用強堿和強酸浸泡，然后用去離子水洗至弱酸性或中性。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的固定化酶的方法，其特征在于，所述酶液為果糖基轉移酶、蔗糖酶、菊糖酶、α-葡萄糖苷酶、乳糖酶或β半乳糖苷酶。

9.一種固定化酶生產功能性低聚糖的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)根據權利要求1至8任意一項所述的方法制備固定化酶；

2)采用間歇式或連續式的生產方法以步驟1)得到的固定化酶生產功能性低聚糖。

10.根據權利要求9所述的方法，其特征在于，所述連續式生產方法為：將所述固定化酶裝入反應柱中，40～60％濃度的底物在40～65℃，pH4～7的條件下通過此柱，得到功能性低聚糖。

11.根據權利要求8所述的方法，其特征在在于，所述底物為被所述固定化酶作用后產生功能性低聚糖的物質。

12.根據權利要求9至11中任一項所述的方法，其特征在在于，所述步驟2)之后，還包括將所述功能性低聚糖脫色、滅菌、色譜提純的步驟。

13.根據權利要求9至12任一項所述的方法，其特征在于，還包括對使用過的離子交換樹脂進行水洗、強堿浸泡、弱堿浸泡，以再生樹脂的步驟。