[發(fā)明專利]固定化酶及其生產(chǎn)功能性低聚糖的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010027186.5
• 申請(qǐng)日: 2020-01-10
• 公開（公告）號(hào): CN111172145A
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾憲維;謝志龍;楊新球;魏遠(yuǎn)安;陳振鵬;戴健興;陳子健;伍劍鋒;浣金剛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 量子高科（中國(guó)）生物股份有限公司
• 主分類號(hào): C12N11/08
• 分類號(hào): C12N11/08;C12P19/00;C12P19/04;C12P19/12
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 江側(cè)燕

1.一種固定化酶的方法，其特征在于，包括：將離子交換樹脂與酶液混合進(jìn)行反應(yīng)，生成固定化酶；其中，所述離子交換樹脂包含仲胺基、叔胺基或季銨基官能團(tuán)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述離子交換樹脂為大孔型樹脂，優(yōu)選為苯乙烯系樹脂、酚醛樹脂。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述反應(yīng)在電導(dǎo)3～20ms/cm條件下進(jìn)行；優(yōu)選地，所述反應(yīng)在電導(dǎo)5～15ms/cm條件下進(jìn)行。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述反應(yīng)時(shí)間為5～40h，溫度為6～35℃；優(yōu)選反應(yīng)時(shí)間為8～24h，溫度為8～25℃。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述離子交換樹脂與酶液按照1g：10～200U的比例進(jìn)行混合；優(yōu)選1g：60～150U。

6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的固定化酶的方法，其特征在于，所述離子交換樹脂為活化后的離子交換樹脂，活化的方法為：強(qiáng)堿性樹脂用堿和酸依次浸泡，弱堿性樹脂直接用去離子水浸泡。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的固定化酶的方法，其特征在于，對(duì)于官能團(tuán)為季銨基的離子交換樹脂，其活化的方法為：依次用強(qiáng)堿和強(qiáng)酸浸泡，然后用去離子水洗至弱酸性或中性。

8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中任一項(xiàng)所述的固定化酶的方法，其特征在于，所述酶液為果糖基轉(zhuǎn)移酶、蔗糖酶、菊糖酶、α-葡萄糖苷酶、乳糖酶或β半乳糖苷酶。

9.一種固定化酶生產(chǎn)功能性低聚糖的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)根據(jù)權(quán)利要求1至8任意一項(xiàng)所述的方法制備固定化酶；

2)采用間歇式或連續(xù)式的生產(chǎn)方法以步驟1)得到的固定化酶生產(chǎn)功能性低聚糖。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于，所述連續(xù)式生產(chǎn)方法為：將所述固定化酶裝入反應(yīng)柱中，40～60％濃度的底物在40～65℃，pH4～7的條件下通過此柱，得到功能性低聚糖。

11.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在在于，所述底物為被所述固定化酶作用后產(chǎn)生功能性低聚糖的物質(zhì)。

12.根據(jù)權(quán)利要求9至11中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在在于，所述步驟2)之后，還包括將所述功能性低聚糖脫色、滅菌、色譜提純的步驟。

13.根據(jù)權(quán)利要求9至12任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，還包括對(duì)使用過的離子交換樹脂進(jìn)行水洗、強(qiáng)堿浸泡、弱堿浸泡，以再生樹脂的步驟。