[發(fā)明專利]一種海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑及其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010025207.X
• 申請(qǐng)日: 2020-01-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111117903A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韋瑩瑩;韓佩佩;邵興鋒;許鳳;王鴻飛;郜海燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 寧波大學(xué);浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N1/16
• 分類號(hào): C12N1/16;A01N63/32;A01P3/00;C12R1/645
• 代理公司: 寧波奧圣專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33226
• 代理人: 何仲

本發(fā)明公開(kāi)了一種海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑及其制備方法和應(yīng)用，特點(diǎn)是由含保藏編號(hào)為CGMCC No.15618的海洋源鎖擲孢酵母的酵母懸浮液、脫脂乳粉、聚乙二醇和海藻糖組成，脫脂乳粉添加質(zhì)量為酵母懸浮液的0.75?2.25%，聚乙二醇添加質(zhì)量為酵母懸浮液的0.1875?0.2500%，海藻糖添加質(zhì)量為酵母懸浮液的3.75?5.25%，其制備方法包括以下步驟：將海洋源鎖擲孢酵母接種于NYDB培養(yǎng)基中振蕩培養(yǎng)，獲得發(fā)酵液，離心取沉淀用NaCl溶液制成酵母懸浮液加入脫脂乳粉、聚乙二醇和海藻糖，混合后冷凍干燥即獲得海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑，優(yōu)點(diǎn)是菌株存活率高且對(duì)蘋(píng)果黑腐病、青霉病和灰霉病防治效果佳。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種凍干制劑，尤其是涉及一種海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

海洋酵母是生活在海洋中酵母的統(tǒng)稱，長(zhǎng)期處于低溫、高鹽、高壓的生態(tài)環(huán)境中，更能耐受果蔬采后復(fù)雜的貯運(yùn)環(huán)境，是一種新型的生物拮抗菌來(lái)源。海洋源鎖擲孢酵母（Sporidiobolus pararoseus）是分離自海洋中的一株對(duì)果蔬采后常見(jiàn)病原菌灰葡萄孢霉具有拮抗作用的酵母。研究表明，海洋源鎖擲孢酵母安全穩(wěn)定、不產(chǎn)毒素、能在果蔬表面生長(zhǎng)定植、能夠耐受低溫貯藏環(huán)境，對(duì)果蔬采后病害具有良好的生物防治效果。因此，海洋源鎖擲孢酵母是一株具有發(fā)展?jié)摿Φ纳锓乐尉辏苽涑缮乐苿⑼七M(jìn)其在果蔬采后病害防治中的應(yīng)用。

生防菌通常制備成液體型制劑和固體型制劑，液體型制劑制備方法簡(jiǎn)單方便、不需要干燥，但是不便于保存和運(yùn)輸，而固體型制劑雖然干燥成本高，但保存時(shí)間長(zhǎng)、不易染雜菌、貯存和運(yùn)輸成本低，目前國(guó)際市場(chǎng)上商業(yè)化的生防產(chǎn)品都是固體型制劑。其中，真空冷凍干燥是目前研究較多的活性拮抗菌固體制劑的制備方法，真空冷凍干燥可以將溶液或濕的物料在低溫下凍結(jié)成固態(tài)，然后在真空條件下使水分子直接升華成氣態(tài)，最終達(dá)到脫水干燥的目的。然而，菌株在凍干的過(guò)程中容易喪失活性，為了增強(qiáng)菌株在凍干過(guò)程中的存活性能，在冷凍干燥時(shí)加入適宜的保護(hù)劑，可以在很大程度上減輕或避免冷凍干燥對(duì)細(xì)胞的損傷，提高存活率。然而，添加單一的保護(hù)劑不足以保護(hù)菌體避免冷凍干燥過(guò)程中的損傷，若能將一些合適的保護(hù)劑復(fù)配使用，添加到海洋源鎖擲孢酵母懸浮液中，制備出高活性的凍干制劑，將有助于實(shí)現(xiàn)海洋源鎖擲孢酵母開(kāi)發(fā)成商業(yè)化的生防菌劑。隨著人們對(duì)果蔬農(nóng)藥殘留和食品安全的關(guān)注，為了確保果蔬的衛(wèi)生和安全，生物防治作為一種安全有效、綠色環(huán)保的病害防治技術(shù)的應(yīng)用愈發(fā)重要，因此，存活率高、生物防治效果佳的海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑的開(kāi)發(fā)必然會(huì)推動(dòng)生物防治技術(shù)的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種菌株存活率高、生物防治效果佳的海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑及其制備方法和應(yīng)用，用于減少果蔬采后的病害，有效降低蘋(píng)果黑腐病、青霉病和灰霉病的發(fā)生率。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：一種海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑，由含有保藏編號(hào)為CGMCC No. 15618的海洋源鎖擲孢酵母（Sporidiobolus pararoseus）ZMY-1的酵母懸浮液、脫脂乳粉、聚乙二醇和海藻糖組成，所述的脫脂乳粉添加量為酵母懸浮液質(zhì)量的0.75-2.25%，所述的聚乙二醇的添加量為酵母懸浮液質(zhì)量的0.1875-0.2500%，所述的海藻糖的添加量為酵母懸浮液質(zhì)量的3.75-5.25%。

優(yōu)選的，所述的脫脂乳粉添加量為酵母懸浮液質(zhì)量的1.50%，所述的聚乙二醇的添加量為酵母懸浮液質(zhì)量的0.1875%，所述的海藻糖的添加量為酵母懸浮液質(zhì)量的5.25%。

優(yōu)選的，所述的酵母懸浮液中海洋源鎖擲孢酵母的濃度為1×10⁸ cells/mL。

上述海洋源鎖擲孢酵母凍干制劑的制備方法，包括以下步驟：