[發明專利]消除胰島素自身抗體干擾的胰島素測定試劑盒

在審

• 申請號: 202010022770.1
• 申請日: 2020-01-12
• 公開（公告）號: CN111077323A
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 李立和;苗振偉;李明衛;孫國忠;丁弘;崔喆
• 申請（專利權）人: 天津市寶坻區人民醫院
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/531
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公開了一種消除胰島素自身抗體干擾的胰島素測定試劑盒，屬于免疫分析技術領域。本發明的技術方案是：在樣品稀釋液中含有胰島素自身抗體二抗，樣品稀釋液中胰島素自身抗體二抗與血清中胰島素自身抗體結合，消除了胰島素自身抗體與胰島素測定試劑中胰島素抗體和胰島素產生的競爭性反應，本發明檢測胰島素時不受胰島素自身抗體影響，其使用方法與原有化學發光法相同，經濟方便易行，是一種準確性更高的胰島素檢測方法。

技術領域

本發明屬于免疫分析技術領域；或是利用可見光，通過測試反應的結果產生顏色變化來測試材料的方法。

背景技術

正常情況下，人胰島細胞主要分泌產生并釋放到血液中的是胰島素，在產生胰島素的一系列的過程中，胰島細胞首先合成胰島素原，胰島素原是一條很長的蛋白質鏈，胰島素原在酶的作用下被分解為三段，前后兩段又重新聯接，成為有A鏈和B鏈組成的胰島素，中間一段獨立出來，稱為C肽。

在胰島的β細胞的分泌中，胰島素與C肽總克分子量相等，在臨床實驗室測定中，胰島素的常用單位為uIU/ml，C肽單位為ng/ml，胰島素半衰期為4.8min,而C肽為11分鐘胰島素原為17.5分鐘。因此，胰島素與C肽比值有一定的等比關系，一般為胰島素/C肽為3.1～5.2左右，胰島素高于C肽值。當體內存在胰島素自身抗體時，由于胰島素自身抗體與胰島素測定試劑中的抗體和胰島素產生競爭性反應，造成胰島素測定結果出現偏差，而C肽不受干擾，使胰島素/C肽比值變為0.05～0.98左右，胰島素測定結果出現嚴重偏差，與體內不存在胰島素自身抗體時胰島素/C肽比值恰恰相反。

1型糖尿病是由T細胞介導的β細胞被破壞引起的，具有遺傳傾向。其特征是患者血清中存在循環性自身抗體，包括胰島細胞抗體(ICA)、谷氨酸脫羧酶抗體(GADA)、酪氨酸磷酸酶抗體(IA-2A)、胰島素抗體(IAA)和鋅轉運蛋白8抗體(ZnT8A)。IAA即胰島素自身抗體，其在糖尿病前期階段和1型糖尿病中的陽性率為20-30%。接受異源性胰源素治療的糖尿病病人，其血清中常有抗胰島素抗抗抗體（IAB）存在，這種抗體能結合胰島素形成復合物，使胰島素失活，是對胰島素抵抗的主要原因之一。

發明內容：

為了解決現有技術中血清胰島素測定受內源性胰島素自身抗體的干擾，本發明提供一種經濟方便易行，準確性更高、能夠消除內源性胰島素自身抗體影響的化學發光測定方法。

采用的技術方案是：樣品稀釋液含有胰島素自身抗體二抗的磷酸鹽緩沖液，當血清加入到樣品稀釋液中時，胰島素自身抗體二抗與胰島素自身抗體發生抗原-抗體反應，封閉了胰島素自身抗體與測定試劑中胰島素抗體和胰島素的競爭性反應，避免了胰島素測定反應干擾的發生。

具體實施方式：

下面通過采用安圖A2000PLUS化學發光分析儀測定血清胰島素實施例對本發明做進一步詳細說明。

實施例1

試劑的組成：

a. 胰島素試劑為鄭州安圖生物工程股份有限公司配套試劑，采用雙抗原夾心法原理進行檢測，用胰島素抗體包被磁微粒，辣根過氧化物酶標記胰島素抗體制備酶結合物，通過免疫反應形成抗體-抗原-抗體-酶標復合物，該復合物催化發光底物發出光子，發光強度與胰島素的含量成正比。

b.樣品稀釋液為本發明配置的稀釋液：0.15M KH₂PO₄0.2克，Na₂HPO₄·12H₂O 2.9克，NaCl 8.0克，KCl 0.2克，Tween-20 0.5ml加蒸餾水至1000ml，胰島素自身抗體二抗加入濃度為20IU/ml。

c.胰島素自身抗體測定試劑盒（化學發光法）為深圳市亞輝龍生物科技有限公司生產。

實施例2

試劑的組成：