[發明專利]一種基于可溶性疏水標記載體的液相法制備索馬魯肽的方法

在審

• 申請號: 202010022349.0
• 申請日: 2020-01-09
• 公開（公告）號: CN111116731A
• 公開（公告）日: 2020-05-08
• 發明（設計）人: 馬淑濤;劉興邦
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C07K14/605
• 分類號: C07K14/605;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 鄭平

1.一種基于可溶性疏水標記載體的液相法制備索馬魯肽的方法，其特征在于，包含以下步驟：

在tag載體上依次偶聯氨基酸制備6個碳末端連有tag載體的全保護片段；其中6個碳末端連有tag載體的全保護片段的結構如下：

片段1結構：Boc-His(Trt)-Aib-Glu(OtBu)-Gly-O-tag，

片段2結構：Fmoc-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-O-tag，

片段3結構：Fmoc-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-Glu(OtBu)-Gly-O-tag，

片段4結構：Fmoc-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys{-AEEA-AEEA-Glu[Oct(OtBu)]-OtBu}-Glu(OtBu)-Phe-O-tag；

片段5結構：Fmoc-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-O-tag，

片段6結構：Fmoc-Val-Arg(Pbf)-Gly-Arg(Pbf)-Gly-O-Tag；

脫去上述片段1-5的tag載體，得到不含tag載體的全保護片段1-5；

脫去含有tag載體的片段6的Fmoc保護基，依次偶聯上述不含tag載體的全保護片段5、片段4、片段3、片段2、片段1，得到全保護的含有tag載體的索馬魯肽；

脫去上述全保護的含有tag載體的索馬魯肽的所有保護基以及tag載體，得索馬魯肽粗品，經純化得索馬魯肽精品。

2.如權利要求1所述的制備索馬魯肽的方法，其特征在于，所述tag載體為2，4-二(二十二烷氧基)苯甲醇。

3.如權利要求1所述的制備索馬魯肽的方法，其特征在于，制備碳末端連有tag載體的全保護片段的具體方法為：

1)片段碳末端Fmoc保護的氨基酸連接tag載體：將2，4-二(二十二烷氧基)苯甲醇(tag載體)溶于反應溶劑中，依次加入片段碳末端Fmoc保護的氨基酸、DIC、DMAP，在10-30℃下反應20-30min，反應結束后向反應液中加入不良溶劑析出產物；

2)脫除Fmoc保護基：向含有tag載體的Fmoc保護的多肽(或氨基酸)片段中加入哌啶與DBU，在10-30℃下反應3-5min，反應結束后向溶液中加入HCl調溶液pH至7-8，向溶液中加入不良溶劑析出產物；

3)氨基酸的偶聯：向脫去Fmoc保護基的含有tag載體的多肽(或氨基酸)片段溶于反應溶劑中，加入Fmoc-AA-OH(需偶聯的氨基酸)、縮合劑，在室溫下反應10-30min，反應結束后向反應液中加入不良溶劑析出產物。