[發明專利]棘白菌素B母核降解雜質的去除方法

在審

• 申請號: 202010020116.7
• 申請日: 2020-01-09
• 公開（公告）號: CN113087774A
• 公開（公告）日: 2021-07-09
• 發明（設計）人: 朱兵峰;趙德立;劉治江
• 申請（專利權）人: 魯南制藥集團股份有限公司
• 主分類號: C07K7/56
• 分類號: C07K7/56;C07K1/14
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明屬于抗真菌藥物領域，具體涉及一種棘白菌素B母核降解雜質的去除方法。本發明將棘白菌素B母核溶液調pH，以貫穿模式上柱于大孔吸附樹脂柱，即可高效的去除棘白菌素B母核降解雜質。本發明上柱液中棘白菌素B母核濃度高，樹脂處理量大，相對使用樹脂較少，且不使用有機溶劑洗脫，操作簡便，不使用昂貴設備，大孔樹脂柱高徑比小，不存在層析柱堵塞等問題，可有效將棘白菌素B母核降解雜質去除，棘白菌素收率高，適合工業化生產。

技術領域

本發明屬于抗真菌藥物領域，具體涉及一種棘白菌素B母核降解雜質的去除方法。

背景技術

由于廣譜抗真菌藥物的大量使用，真菌耐藥性逐漸增強。在一些免疫抑制患者包括HIV感染者、器官移植者以及那些患有其他疾病而癥進行免疫治療的患者中，真菌感染無論是其發生頻率還是感染種類都在不斷地增加。因此，迫切需要尋找新的安全有效的抗真菌藥物。

20世紀70年代發現的棘白菌素類藥物為一組天然產物，結構由相似的環狀多肽核心和不同的脂肪酸側鏈組成，通過非競爭性作用機制抑制β-(1,3)-D-葡聚糖的合成，導致細胞壁葡聚糖的排空、滲透不穩定以及真菌細胞的溶解而發揮其抗真菌作用。其作用機制獨特，不良反應率低，作為一種可殺死真菌的藥物表現出抗菌譜廣，活性強的特點，是治療免疫抑制患者和免疫正?；颊哒婢腥镜闹匾x擇藥物。迄今上市的棘白菌素類抗真菌抗生素有三個：卡泊芬凈(默沙東，商品名Cancidas)、米卡芬凈(安斯泰來，商品名Mycamine)和阿尼芬凈(輝瑞，商品名Eraxis)。由于棘白菌素B(Echinocandin B，簡稱為ECB)亞油酸側鏈的存在，其具有一定的溶血毒性；以ECB為先導化合物，通過酰胺水解酶脫去亞油酸側鏈，得到棘白菌素B母核(Echinocandin B Nucleus，簡稱為ECBN)；通過化學合成的方法，在ECBN上連接對戊氧基三聯苯甲酸側鏈，得到阿尼芬凈(Anidulafungin，LY303366)。

在實際生產中，需要純化ECBN，再用于化學合成。CN102336817A公開了一種棘白菌素B母核的分離方法，該方法使用樹脂吸附、洗脫的方法，使用大量的有機溶劑沖洗，且終產品色素殘留多，純度和收率偏低，極大制約了棘白菌素B母核的生產。CN104447961A公開了一種棘白菌素B母核的純化方法，先將棘白菌素母核轉化上柱至大孔吸附樹脂吸附，用含脂肪醇的無機酸水溶液洗脫，再經硅膠柱層析得到純度為97％的棘白菌素B母核。CN107759668A公開了一種高純度棘白菌素B母核或其鹽的純化方法，將樣品上柱于高效液相制備色譜再用含水有機溶劑的洗脫。CN107778359A公開了一種提純棘白菌素B母核的方法，先將轉化液固液分離，濃縮除去水分，加入有機溶劑結晶，得到棘白菌素B母核。CN105566457A公開了一種棘白菌素B母核的純化方法，采用C18反相制備柱分離純化粗品，0.2％乙酸銨水溶液：甲醇＝94:6(V/V)解吸，得到純度99％的棘白菌素B母核。

由于棘白菌素B母核不穩定，在受熱、遇堿或長時間放置條件下，極易降解產生降解雜質，降低了產品純度。采用現有技術的方法重新精制，操作繁瑣，成本較高，且不利于環保。目前報道的棘白菌素母核的純化方法并不單獨針對棘白菌素B母核降解雜質。因此亟需一種針對棘白菌素B母核降解雜質去除的方法。

發明內容

基于棘白菌素B母核性質不穩定，極易發生降解產生降解雜質，本發明的目的在于提供一種簡單有效且適于放大生產的除去棘白菌素B母核降解雜質的方法。

一種棘白菌素B母核降解雜質的去除方法，包括如下步驟：

(1)棘白菌素B母核溶液用酸調pH作為上柱液；

(2)將上柱液以貫穿模式上柱于大孔吸附樹脂柱，收集流出液。

優選地，步驟(1)所述棘白菌素B母核溶液是將棘白菌素B母核溶解在甲醇的水溶液中，甲醇水溶液中甲醇體積分數為0～5％；當甲醇的體積分數為0時，即為棘白菌素B母核溶解在水中。