[發(fā)明專利]一種從三角褐指藻中綜合提取EPA和巖藻黃素的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010020026.8
• 申請日: 2020-01-09
• 公開（公告）號: CN111205179B
• 公開（公告）日: 2022-07-19
• 發(fā)明（設計）人: 李悅明;徐建春;許麗娜;夏修巒;徐炳政
• 申請（專利權(quán)）人: 青島科海生物有限公司
• 主分類號: C07C51/42
• 分類號: C07C51/42;C07C51/48;C07C57/03;C07D303/32;C07D301/32
• 代理公司: 青島智地領創(chuàng)專利代理有限公司 37252
• 代理人: 陳海濱

本發(fā)明公開了一種從三角褐指藻中綜合提取EPA和巖藻黃素的方法，涉及生物活性成分提取技術(shù)領域。其提取方法為：首先將三角褐指藻發(fā)酵液進行離心，收集藻泥，向藻泥中加入緩沖溶液和復合酶，反應獲得酶解液；然后將酶解液進行離心、破乳處理；將所得毛油進行超臨界CO₂純化法獲得EPA和廢油；向廢油中加入有機溶劑混合后，接著加入抗氧化劑，再向其中加入碎片藻泥，進行超聲萃取，之后離心得巖藻黃素萃取液；利用凝膠色譜去除巖藻黃素萃取液中的組分，得巖藻黃素粗液；將巖藻黃素粗液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得巖藻黃素粗粉，然后通過超臨界CO₂純化法獲得巖藻黃素。本發(fā)明極大的提高了微藻原料的利用率，同時具有方法簡便、收率高等特點。

技術(shù)領域

本發(fā)明涉及生物活性成分提取技術(shù)領域，具體涉及一種從三角褐指藻中綜合提取EPA和巖藻黃素的方法。

背景技術(shù)

EPA即二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic Acid)，具有促進細胞代謝，降低膽固醇、緩解關(guān)節(jié)炎及預防和治療心腦血管疾病等多種生理功能。天然EPA的來源主要是魚油和微藻，其中微藻因其含油量高，生長周期短、繁殖快，光能利用率高的特點，日益成為EPA的主要來源。微藻中EPA的提取大致分為細胞破壞、總酯提取和進一步純化三個階段，目前通常采用機械法、化學法和水酶法進行細胞破壞。其中水酶法具有設備簡單，操作簡便安全，效率高的特點。巖藻黃素(Fucoxanthin)也被稱為褐藻黃素、巖藻黃素，是類胡蘿卜素中葉黃素類的一種天然脂溶性色素，顏色呈淡黃至褐色，是褐藻、硅藻、金藻及黃綠藻所含有的色素。多項研究表明，巖藻黃素具有抗腫瘤、抗氧化、神經(jīng)細胞保護及減肥等作用。巖藻黃質(zhì)的提取多采用有機溶劑萃取，超臨界CO₂萃取、超聲波輔助提取及酶提法等方法。

三角褐指藻(Phaeodactylum tricornutum)是一種屬硅藻門單細胞海洋微藻，具有卵形，梭形，和三出放射形三種不同的形態(tài)，這三種形態(tài)在不同的環(huán)境條件下可以轉(zhuǎn)變。如在正常的液體培養(yǎng)的條件下，多是三出放射形細胞和少量的梭形細胞，這兩種形態(tài)都沒有硅質(zhì)的細胞壁。三角褐指藻性狀穩(wěn)定，繁殖速度快，適合大規(guī)模培養(yǎng)，細胞內(nèi)具有多種生物活性成分，包括多不飽和脂肪酸(PUFA)、巖藻黃質(zhì)和多糖等，其中多不飽和脂肪酸中的EPA占總脂肪酸含量的30％以上，具有很高的經(jīng)濟利用價值。目前對于微藻生物活性成分的提取利用，多采用提取單獨活性物質(zhì)的方法，提取效率和微藻原料的利用率都有待進一步提高，從而造成成產(chǎn)成本普遍偏高，難以實現(xiàn)微藻經(jīng)濟價值的最大化，從一定程度上制約了微藻規(guī)模化產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種從三角褐指藻中綜合提取EPA和巖藻黃素的方法，該方法通過復合酶解、超臨界CO₂萃取獲得高純度EPA；通過有機溶劑將廢藻油及碎片藻泥中巖藻黃素萃取出來，進而利用凝膠色譜、超臨界CO₂萃取分離純化巖藻黃素。

一種從三角褐指藻中綜合提取EPA和巖藻黃素的方法，依次包括以下步驟：

a、將三角褐指藻發(fā)酵液進行離心，收集藻泥，向所述藻泥中加入緩沖溶液和復合酶，反應獲得酶解液；

b、將所述的酶解液進行離心、破乳處理，分別得到毛油、水相和碎片藻泥；

c、將所述的毛油進行超臨界CO₂純化法獲得EPA和廢油；

d、向所述的廢油中加入有機溶劑混合后，接著加入抗氧化劑，再向其中加入步驟b所述的碎片藻泥，進行超聲萃取，之后離心得巖藻黃素萃取液；

e、利用凝膠色譜去除所述巖藻黃素萃取液中的油脂、有機磷、重金屬后，得巖藻黃素粗液；

f、將所述的巖藻黃素粗液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得巖藻黃素粗粉，然后通過超臨界CO₂純化法獲得巖藻黃素。