[發明專利]一組桑樹細菌性枯萎病病原克雷伯氏菌的PCR檢測引物及應用

有效

• 申請號: 202010019046.3
• 申請日: 2020-01-08
• 公開（公告）號: CN111073988B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 劉吉平;羅龍輝
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/10;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/22;C12R1/01
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 段卉

本發明公開了一組桑樹細菌性枯萎病病原克雷伯氏菌的PCR檢測引物及應用，本發明根據桑樹細菌性枯萎病病原克雷伯氏菌設計了一組克雷伯氏菌的PCR檢測引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示，其能夠用于感染桑細菌性枯萎病病原菌克雷伯氏菌的病株及根際土壤樣本的檢測，具有很好的檢測效果，這對于這對桑園桑樹病害中桑細菌性枯萎病病原菌克雷伯氏菌的快速檢測具有重要意義，有很好的應用價值，值得推廣。

技術領域

本發明涉及植物病害檢測技術領域，更具體地，涉及一組桑樹細菌性枯萎病病原克雷伯氏菌的PCR檢測引物及應用。

背景技術

桑在蠶桑產業發展和變革中，有著基礎性的地位，起著先導性的作用。隨著桑產業的轉型，在桑樹資源的綜合利用及桑樹產業的不斷開發和桑全基因組測序完成，全面開展功能基因研究的背景下，桑樹的基礎研究將成為桑產業發展和創新的重要支撐。

桑枯萎病作為最重要的桑樹細菌病害之一，在我國浙江及華南蠶區發生較普遍且危害嚴重。該病對桑葉的產量影響非常大，嚴重阻礙蠶桑業發展。

桑樹細菌性枯萎病病害特征較為典型，其為全株性病害，發病初期，上部分枝條枯萎褐化，葉片外緣先開始失水翻卷，隨后，自上而下整株枯萎并開始脫落。剖開病株的莖、根的表皮，木質部有不同程度的黃化，褐化現象，產生褐色條紋，嚴重時木質部周身變褐變黑，根部腐爛。

桑細菌性枯萎病是一種典型的毀滅性突出病害，其病原多樣化，包括腸桿菌屬的陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)、阿氏腸桿菌(Enterobacter asburiae)、桑腸桿菌(Enterobacter mori.)三種病原，克雷伯氏桿菌屬(Klebsiella)的肺炎桿菌(K.pneumoniae)、克雷伯氏菌(K.variicola)、產酸克雷伯氏菌(K.Oxy toca)三種病原以及泛菌屬(Pantoea)的菠蘿泛菌(Pantoea ananatis)病原。目前只對桑腸桿菌(E.mori)和陰溝腸桿菌(Enterobacter cloacae)，及菠蘿泛菌(Pantoea ananatis)建立了分子檢測方法，而?？菸〔≡坏目死撞暇?Klebsiella)尚未建立相應的檢測方法，嚴重影響了病害檢疫及防治。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術沒有針對引起桑樹細菌性枯萎病的克雷伯氏菌的檢測方法不足，提供一組桑樹細菌性枯萎病克雷伯氏菌PCR檢測引物及應用。

本發明的第一個目的是提供一組克雷伯氏菌的PCR檢測引物。

本發明的第二個目的是提供所述PCR檢測引物在克雷伯氏菌和/或桑樹細菌性枯萎病的檢測中的應用。

本發明的第三個目的是提供所述PCR檢測引物在制備克雷伯氏菌和/或桑樹細菌性枯萎病的檢測試劑盒中的應用。

本發明的第四個目的是提供一種克雷伯氏菌的檢測試劑盒。

本發明的第五個目的是提供一種克雷伯氏菌的檢測方法。

為了實現上述目的，本發明是通過以下技術方案予以實現的：

本發明要求保護一組克雷伯氏菌的PCR檢測引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～2所示。

SEQ ID NO：1：ATTGCGTAGAAGAGCCTGAA；

SEQ ID NO：2：CAGGACACGCAGTTAAGACC。

本發明還要求保護以下內容：

所述PCR檢測引物在克雷伯氏菌和/或桑樹細菌性枯萎病的檢測中的應用。

所述PCR檢測引物在制備克雷伯氏菌和/或桑樹細菌性枯萎病的檢測試劑盒中的應用。

進一步本發明要求一種克雷伯氏菌的檢測試劑盒，包括所述檢測引物。