[發(fā)明專利]一種用于檢測胃蛋白酶的熒光探針及其在診斷胃食管反流中的應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010016506.7 | 申請日： | 2020-01-08 |
| 公開（公告）號： | CN111187208B | 公開（公告）日： | 2022-08-12 |
| 發(fā)明（設計）人： | 劉鳳玉;段志軍;孫世國;楊子皓;梁金;王智舉 | 申請（專利權）人： | 大連理工大學 |
| 主分類號： | C07D221/14 | 分類號： | C07D221/14;C09K11/06;G01N21/64 |
| 代理公司： | 大連東方專利代理有限責任公司 21212 | 代理人： | 李銀姬;李馨 |
| 地址： | 116024 遼*** | 國省代碼： | 遼寧;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 檢測 胃蛋白酶 熒光 探針 及其 診斷 食管 中的 應用 | ||
1.一種用于檢測胃蛋白酶的熒光探針，具有如式(Ⅰ)的結構式：
式(Ⅰ)中，
R1選自OH和CH3；
R2選自(CH3)2N和(C2H5)2N。
2.一種胃蛋白酶檢測試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括權利要求1所述的熒光探針。
3.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括底物工作液、甘氨酸-鹽酸緩沖液。
4.如權利要求3所述的試劑盒的使用方法，包括如下步驟：
a)將熒光探針加入到甘氨酸-鹽酸緩沖溶液中，再加入底物工作液，得熒光發(fā)射體系；
b)在步驟a)的熒光發(fā)射體系中加入胃蛋白酶，檢測熒光強度的變化。
5.根據權利要求4所述的使用方法，其特征在于，在步驟a)中，所述的熒光探針在所述熒光發(fā)射體系中的濃度為1.0-10.0μM。
6.根據權利要求4所述的使用方法，其特征在于，在步驟a)中，所述底物工作液由不與化合物發(fā)生化學反應而能夠穩(wěn)定胃蛋白酶活性的蛋白質配制而成，所述蛋白質在所述熒光發(fā)射體系中的濃度為15.0-45.0μM。
7.根據權利要求4所述的使用方法，其特征在于，在步驟a)中，所述甘氨酸-鹽酸緩沖溶液的pH為2.0-3.0，甘氨酸濃度為20-50mM。
8.根據權利要求4所述的使用方法，其特征在于，在步驟b)中，將胃蛋白酶加入到熒光發(fā)射體系中，胃蛋白酶在所述熒光發(fā)射體系中的終濃度為0μg/mL-1.2μg/mL。
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