[發(fā)明專利]一種基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010014816.5
• 申請(qǐng)日: 2020-01-07
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111208308A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊潤(rùn)琳;周彬;呂中偉;張玨;郭明明;張旭;張藝;范俊;金浩然
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省原子醫(yī)學(xué)研究所;無(wú)錫市江原實(shí)業(yè)技貿(mào)總公司
• 主分類號(hào): G01N33/76
• 分類號(hào): G01N33/76;G01N33/574;G01N33/558;G01N33/543
• 代理公司: 南京燦爛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32356
• 代理人: 李志鴻

本發(fā)明公開(kāi)了一種基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法，包括，底板、層析膜、吸水紙、樣品墊、熒光微球溶液；所述熒光微球偶聯(lián)有標(biāo)記抗體，所述標(biāo)記抗體為FSHβ亞基抗體2或抗體4；所述層析膜上設(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述質(zhì)控線上涂有抗FSHβ亞基抗體2或抗體4同源IgG的抗體；所述檢測(cè)線上涂有FSHβ亞基抗體4或抗體2。本發(fā)明優(yōu)選將FSH的β亞基作為卵巢癌檢測(cè)指標(biāo)，從眾多抗體中優(yōu)選出特異性良好的抗體，并進(jìn)行組合，檢測(cè)靈敏度和特異性得了顯著提高，偏差小，實(shí)現(xiàn)了利用FSH檢測(cè)卵巢癌的快速精準(zhǔn)檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于熒光層析試紙制備方法技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法。

背景技術(shù)

卵泡刺激素(FSH)是垂體前葉嗜堿性細(xì)胞分泌的一種激素，為卵泡刺激素受體(FSHR)內(nèi)源性配體，由α和β兩條亞基組成。FSH與促黃體生成素(LH)、促甲狀腺素(TSH)、絨毛膜促性腺激素(HCG)具有相同的由92個(gè)氨基酸組成的α亞基；其獨(dú)有的β亞基由111個(gè)氨基酸組成，具有與FSHR特異性結(jié)合的功能，其中33-53片段與FSHR結(jié)合力最強(qiáng)。FSH分子量約30Kd，半衰期3-4小時(shí)。一般在檢測(cè)FSH時(shí)主要檢測(cè)其β亞基。

有研究通過(guò)放射免疫方法檢測(cè)了卵巢癌組織液中FSH含量，結(jié)果表明卵巢腫瘤組織液中FSH的濃度在良性與惡性之間、良性與交界性之間都有顯著差異，并且隨著卵巢惡性程度的增高而升高，但是FSH相關(guān)檢測(cè)產(chǎn)品是否能夠準(zhǔn)確的診斷惡性腫瘤尚未明確。

發(fā)明內(nèi)容

本部分的目的在于概述本發(fā)明的實(shí)施例的一些方面以及簡(jiǎn)要介紹一些較佳實(shí)施例。在本部分以及本申請(qǐng)的說(shuō)明書(shū)摘要和發(fā)明名稱中可能會(huì)做些簡(jiǎn)化或省略以避免使本部分、說(shuō)明書(shū)摘要和發(fā)明名稱的目的模糊，而這種簡(jiǎn)化或省略不能用于限制本發(fā)明的范圍。

作為本發(fā)明其中一個(gè)方面，本發(fā)明提供一種基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：一種基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法，其包括，底板、層析膜、吸水紙、樣品墊、熒光微球溶液；所述熒光微球偶聯(lián)有標(biāo)記抗體，所述標(biāo)記抗體為FSHβ亞基抗體2或抗體4；

所述層析膜上設(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述質(zhì)控線上涂有抗FSHβ亞基抗體2或抗體4同源IgG的抗體；所述檢測(cè)線上涂有FSHβ亞基抗體4或抗體2。

作為本發(fā)明所述的基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法的一種優(yōu)選方案：所述標(biāo)記抗體與所述熒光微球的質(zhì)量比為15～25μg抗體/mg熒光微球。

作為本發(fā)明所述的基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法的一種優(yōu)選方案：所述熒光微球溶液，其工作液中熒光微球濃度為10～15μg/ml。

作為本發(fā)明所述的基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法的一種優(yōu)選方案：所述熒光微球溶液，其工作液為0.05M pH7.4的磷酸鹽緩沖液。

作為本發(fā)明所述的基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法的一種優(yōu)選方案：質(zhì)控線上的抗體含量為0.5～2μg/cm。

作為本發(fā)明所述的基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法的一種優(yōu)選方案：檢測(cè)線上的抗體含量為0.5～2μg/cm。

作為本發(fā)明所述的基于FSH快速檢測(cè)輔助卵巢癌診斷的熒光免疫層析試紙的制備方法的一種優(yōu)選方案：所述FSH，其β亞基的氨基酸序列為：NSCELTNITIAIEKEECRFCISINTTWCAGYCYTRDLVYKDPARPKIQKTCTFKELVYETVRVPGCAHHADSLYTYPVATQCHCGKCDSDSTDCTVRGLGPSYCSFGEMKE。