[發(fā)明專利]一種D-葡萄糖的檢測方法和應用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010013434.0 | 申請日： | 2020-01-07 |
| 公開（公告）號： | CN111189783B | 公開（公告）日： | 2022-07-19 |
| 發(fā)明（設計）人： | 程佳吉;王秋實;郝俊杰;林家穎 | 申請（專利權）人： | 湖北大學 |
| 主分類號： | G01N21/19 | 分類號： | G01N21/19 |
| 代理公司： | 北京品源專利代理有限公司 11332 | 代理人： | 鞏克棟 |
| 地址： | 430062 湖北*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 葡萄糖 檢測 方法 應用 | ||
1.一種D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括利用手性半胱氨酸封端的二氧化鉬進行檢測。
2.根據(jù)權利要求1所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法包括如下步驟：
(1)繪制標準曲線；
(2)將待測樣品與手性半胱氨酸封端的二氧化鉬混合，檢測混合溶液的圓二色光譜；
(3)通過步驟(2)中得到的圓二色光譜的CD峰絕對值，對應標準曲線，確定待測樣品中D-葡萄糖的濃度。
3.根據(jù)權利要求2所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述標準曲線以D-葡萄糖的濃度為橫坐標，以手性半胱氨酸封端的二氧化鉬的圓二色光譜的CD峰絕對值為縱坐標。
4.根據(jù)權利要求2或3所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述標準曲線的繪制方法包括如下步驟：
(A)分別配置不同濃度的D-葡萄糖溶液，所述D-葡萄糖溶液中包括葡萄糖氧化酶；
(B)將D-葡萄糖溶液與手性半胱氨酸封端的二氧化鉬混合，利用圓二色光譜檢測手性半胱氨酸封端的二氧化鉬的CD峰絕對值；
(C)以D-葡萄糖的濃度為橫坐標，以CD峰絕對值為縱坐標，繪制標準曲線。
5.根據(jù)權利要求4所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(A)所述D-葡萄糖溶液中D-葡萄糖的濃度為0-100000μM。
6.根據(jù)權利要求5所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(A)所述D-葡萄糖溶液中D-葡萄糖的濃度為200-1000μM。
7.根據(jù)權利要求4所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(A)中配制3種以上不同濃度的D-葡萄糖溶液。
8.根據(jù)權利要求7所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(A)中配制5種以上不同濃度的D-葡萄糖溶液。
9.根據(jù)權利要求8所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述D-葡萄糖溶液中，所述葡萄糖氧化酶的濃度為50-400U/mL。
10.根據(jù)權利要求4所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(B)中的混合溶液中，所述手性半胱氨酸封端的二氧化鉬的濃度為0.1-100mmol/L。
11.根據(jù)權利要求10所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(B)中的混合溶液中，所述手性半胱氨酸封端的二氧化鉬的濃度為10mmol/L。
12.根據(jù)權利要求4所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(B)所述混合的時間為10-120min。
13.根據(jù)權利要求12所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，步驟(B)所述混合的時間為30min。
14.根據(jù)權利要求1所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸封端的二氧化鉬包括L-半胱氨酸封端的二氧化鉬和/或D-半胱氨酸封端的二氧化鉬。
15.根據(jù)權利要求1所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸封端的二氧化鉬的制備方法如下：
利用手性半胱氨酸與三氧化鉬反應，得到手性半胱氨酸封端的二氧化鉬。
16.根據(jù)權利要求15所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述手性半胱氨酸和所述三氧化鉬的摩爾比為(50-200):3。
17.根據(jù)權利要求15所述的D-葡萄糖的檢測方法，其特征在于，所述反應包括超聲5min后在避光反應下孵育1周。
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