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[發明專利]黃曲霉致病基因fadA在篩選防治黃曲霉污染藥物中的應用有效

專利信息
申請號: 202010013368.7 申請日: 2020-01-07
公開(公告)號: CN111172310B 公開(公告)日: 2023-05-12
發明(設計)人: 楊坤龍;耿青如;宋鳳琴;賀曉娜;趙煒;王雪薇;王娜;鄧黃玥;馬倩楠;田俊 申請(專利權)人: 江蘇師范大學
主分類號: C12Q1/6895 分類號: C12Q1/6895;G01N33/569
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 221000 江*** 國省代碼: 江蘇;32
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摘要:
搜索關鍵詞: 黃曲霉 致病 基因 fada 篩選 防治 污染 藥物 中的 應用
【權利要求書】:

1.一種篩選抑制黃曲霉致病或防治黃曲霉污染的藥物的方法,其特征在于所述方法包括檢測黃曲霉致病基因fadA水平或FadA蛋白的表達水平。

2.根據權利要求1所述的方法,其特在于,所述方法具體包括:

S1:構建檢測組黃曲霉菌培養體系和對照組黃曲霉菌培養體系,其中,檢測組中添加待篩選藥物;

S2:將檢測組和對照組在相同條件下培養一段時間后,對比檢測組和對照組中黃曲霉菌內的fadA基因或FadA蛋白的表達水平,若檢測組中黃曲霉菌內的fadA基因或FadA蛋白的表達水平在一定程度上低于對照組,則待篩選藥物為潛在抑制黃曲霉致病性藥物。

3.根據權利要求2所述的方法,其特在于,所述步驟S2中,通過熒光定量qPCR或Northern?blot雜交分析檢測檢測組和對照組中的黃曲霉菌內fadA基因mRNA表達水平。

4.根據權利要求2所述的方法,其特在于,所述步驟S2中,通過Western?blot免疫印跡雜交分析或酶聯免疫吸附法分析檢測檢測組和對照組中的黃曲霉菌內FadA蛋白表達水平。

5.根據權利要求4所述的方法,其特在于,用于分析檢測FadA蛋白表達水平的相應抗體是針對FadA蛋白或蛋白片段的抗體或是在FadA蛋白C端與小分子多肽標簽進行融合表達后針對小分子多肽標簽的抗體。

6.根據權利要求5所述的方法,其特在于,所述小分子多肽標簽為GFP標簽、RFP標簽、His標簽、HA標簽、Flag標簽或GST標簽。

7.根據權利要求2所述的方法,其特在于,還包括步驟S3:使用篩選出的所述潛在抑制黃曲霉致病性藥物進行黃曲霉生長、產孢、產毒抑制測試或黃曲霉種子侵染抑制測試確認所述潛在抑制黃曲霉致病性藥物是否為抑制黃曲霉致病性藥物。

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