[發明專利]一種基于微生物PCR技術檢測膚質的試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202010007408.7
• 申請日: 2020-01-04
• 公開（公告）號: CN110951854A
• 公開（公告）日: 2020-04-03
• 發明（設計）人: 李琳琳;沈菲;陳漢奎;黨瓊;黃仲曦;汪佳宏;李高生
• 申請（專利權）人: 廣州中鑫基因醫學科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6876
• 分類號: C12Q1/6876;C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04
• 代理公司: 廣州一銳專利代理有限公司 44369
• 代理人: 楊昕昕;甘奎強

本發明涉及生物技術領域，提供一種基于微生物PCR技術檢測膚質的試劑盒及檢測方法，用于提供一種膚質檢測的新手段。本發明提供的一種基于微生物PCR技術檢測膚質的試劑盒，包括：痤瘡丙酸桿菌特異引物及其探針、乳酸菌屬通用引物及其探針、內參引物、陽性對照樣品模板、陰性對照樣品模板、用于PCR的反應試劑；所述痤瘡丙酸桿菌特異引物及其探針為：上游引物Pro?F 5′?CCACAACAACCTAGAGTC?3′；下游引物Pro?R 5′?GAACGGAATTAAGTCTGTAAG?3′；探針：FAM?ATAACCACACGCCTACCACGAT?BHQ1。檢測方法簡單、耗時短。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種基于微生物PCR技術檢測膚質的試劑盒。

背景技術

傳統的膚質檢測是利用電子拍照技術，或利用皮膚探測器檢測，獲取用戶的皮膚圖片信息或生物電阻抗數據來分析皮膚的水分狀況。利用基因基因測序技術能做到檢測病原菌，例如檢測到馬拉色菌（糠疹分枝桿菌）能夠作為花斑癬的指示病原菌。但是皮膚微生物群做為皮膚水分油脂狀況的生物標志物無前人研究。目前常用的皮膚上微生物檢測方法是培養基菌落培養技術，該技術原理基于細胞培養的方法例如形態學觀察。

微生物形成菌落需要適宜的溫度、濕度、培養條件、需要依賴培養，形成是肉眼可見菌落周期長、鑒定準確度低；其次有些微生物培養環境苛刻，因此難以培養鑒定。同時病原菌基因測序技術檢測成本高。

發明內容

本發明解決的技術問題為提供一種膚質檢測的新手段，提供一種基于微生物PCR技術檢測膚質的試劑盒。

為了解決上述技術問題，本發明提供的技術方案為：

一種基于微生物PCR技術檢測膚質的試劑盒，包括：痤瘡丙酸桿菌特異引物及其探針、乳酸菌屬通用引物及其探針、內參引物、陽性對照樣品模板、陰性對照樣品模板、用于PCR的反應試劑；

所述痤瘡丙酸桿菌特異引物及其探針為：

上游引物Pro-F 5′-CCACAACAACCTAGAGTC-3′

下游引物Pro-R 5′-GAACGGAATTAAGTCTGTAAG-3′

探針：FAM-ATAACCACACGCCTACCACGAT-BHQ1。

采用該特異引物來檢測是否存在痤瘡丙酸桿菌。

特異引物檢測痤瘡丙酸桿菌的特異性、靈敏性和重復性高。

優選地，所述乳酸菌屬通用引物及其探針為：

上游引物Lab-F 5′-GGGAATCTTCCACAATGGAC-3′

下游引物Lab-R 5′-CATGGAGTTCCACTCTCCTCT-3′

探針：VIC-ATAACCACACGCCTACCACGAT-BHQ1。采用該乳酸菌屬通用引物可以快速地檢測出是否存在乳酸菌。

優選地，所述內參引物為GAPDH基因引物，所述GAPDH基因引物為：

上游引物GAPDH-F 5′-ACAGCCTCAAGATCATCAGCA-3′

下游引物GAPDH-R 5′-ATGAGTCCTTCCACGATACCA-3′

探針：CY5-GTGCTAAGCAGTTGGTGGTGCAGGA-BHQ2。

優選地，所述陽性對照模板為純化過的標準痤瘡丙酸桿菌菌株基因組DNA以及純化過的標準乳酸菌菌株基因組DNA；

所述陰性對照模板為去離子水。