[發明專利]一種DNA納米線放大的共敏光電檢測平臺及其制法和應用

有效

• 申請號: 202010007358.2
• 申請日: 2020-01-04
• 公開（公告）號: CN111157598B
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 接貴芬;高曉姍
• 申請（專利權）人: 青島科技大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30;G01N27/327
• 代理公司: 青島中天匯智知識產權代理有限公司 37241
• 代理人: 郝團代

1.一種基于DNA納米線放大的光致電共敏生物傳感平臺的檢測應用，其特征是：利用具有光電活性的Bi₂O₃-ZnO材料及敏化劑CdS QDs形成共敏結構，結合Exo III輔助多重放大技術，通過構建DNA納米線，制備了一種方便、實用的光致電化學傳感平臺，實現了對凝血酶的超靈敏檢測；目標凝血酶引發Exo III輔助多重放大反應，釋放大量DNA a1；同時，兩條單鏈DNA通過錯位雜交形成可以標記敏化劑CdS QDs的DNA納米線；利用a1做橋梁，敏化劑CdSQDs與基底材料Bi₂O₃-ZnO構成共敏結構，實現了凝血酶的超靈敏檢測；

其特征方法由下列步驟組成：

步驟1.Exo III輔助多重放大過程：將10μL 20μM凝血酶適體和10μL 20μM觸發器放在離心管中并加熱至90℃保持5分鐘，自然冷卻獲得拱形結構；將2μL不同濃度凝血酶溶液加入到含有2μL拱形結構溶液，16μL 10μM HP和10U Exo III的離心管中在37℃下孵育2小時，釋放出大量a1鏈；

步驟2.CdS QDs標記的納米線過程：將60μL 1μM DNA1和60μL 1μM DNA2混合溶液95℃下加熱5分鐘，自然冷卻形成DNA納米線b溶液 ；然后，將100μL活化好的CdS量子點和20μL10μM DNA3混合溶液中在37℃下反應6小時，低速離心1分鐘；將所得到的沉淀和上述納米線b溶液混合，在37℃下反應2小時，獲得CdS QDs標記的納米線結構c；

步驟3.PEC傳感平臺的制備和檢測應用：將10μL 15mg/ mLBi₂O₃-ZnO懸浮液滴在ITO電極上；然后，將10μL 10μM cDNA溶液滴在納米復合材料上，在37℃下反應6小時；同時，上述30μL CdS QDs標記的納米線結構 c和a1鏈在37℃下孵育2小時；緊接著，將10μL上述溶液加入到修飾好的電極上孵育2小時，使a1鏈另一端與cDNA雜交；最后，將修飾好的電極用TE緩沖液洗滌以除去未雜交的DNA鏈并在空氣中干燥，測量PEC信號。