[發明專利]一種生孢梭菌的穩定劑及其應用

有效

• 申請號: 202010007332.8
• 申請日: 2020-01-04
• 公開（公告）號: CN110982762B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 盧勉飛;徐環;蔡芷荷;吳清平;李澤康;何志毅;李遠強
• 申請（專利權）人: 廣東環凱生物科技有限公司;廣東環凱微生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;C12Q1/06;C12R1/145
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 鄭瑩

1.一種生孢梭菌的穩定劑，溶劑為水，其特征在于：其溶質的質量百分數為：0.1%-1%檸檬酸鈉、0.5%-2%植酸、1%-2%半胱氨酸、8%-12%脫脂奶粉、0.05%-0.3%聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯。

2.一種生孢梭菌定量化質控品，其特征在于：由生孢梭菌菌液與權利要求1所述的穩定劑混勻后，定量后分裝、凍干得到。

3.根據權利要求2所述的定量化質控品，其特征在于：所述生孢梭菌的含量為300-1000CFU/瓶。

4.一種如權利要求2或3所述的生孢梭菌定量化質控品的制備方法，包括如下步驟：

（1）菌株復蘇：生孢梭菌接種至復蘇培養基，復蘇傳代；

（2）增菌：復蘇的生孢梭菌接種至增殖培養基中，培養增殖，得生孢梭菌菌液；

（3）計數：將生孢梭菌菌液與權利要求1所述的穩定劑混勻，計數后分裝，得定量化生孢梭菌菌液；

（4）凍干：將定量化生孢梭菌菌液冷凍干燥，密封得到生孢梭菌定量化質控品。

5.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：步驟（2）中所述增殖培養基包含以下質量分數的原料：0.1%-2%蛋白胨，0.5%-2%大豆胨，0.2%-2%牛肉粉，0.1%-2%酵母粉，0.05%-0.5%可溶性淀粉、0.2%的L-半胱氨酸鹽酸鹽。

6.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：步驟（4）中所述冷凍干燥為采用液氮快速冷凍后，置于已預冷至-30℃至-40℃的冷凍干燥箱中平衡，真空干燥后解析干燥至樣品含水量為0-3%。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于：所述真空干燥的條件為：真空度10Pa-100Pa，干燥溫度-35℃至-15℃，干燥時間20h-48h；所述解析干燥的條件為：干燥溫度0℃-25℃。

8.根據權利要求4所述的制備方法，其特征在于：步驟（3）中的計數方法為吸光度標準曲線法。