[發明專利]一種肌酸激酶同工酶測定試劑盒

有效

• 申請號: 202010004007.6
• 申請日: 2020-01-03
• 公開（公告）號: CN111057746B
• 公開（公告）日: 2023-10-27
• 發明（設計）人: 商憶文;林耀文
• 申請（專利權）人: 浙江夸克生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/48
• 分類號: C12Q1/48;C12Q1/32;G01N33/573
• 代理公司: 北京精金石知識產權代理有限公司 11470
• 代理人: 張黎

本發明公開了一種肌酸激酶同工酶測定試劑盒，涉及生物檢測技術領域。包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2，其成分為：試劑R1：咪唑醋酸；D?葡萄糖；醋酸鎂L；己糖激酶；N?乙酰半胱氨酸；二磷酸腺苷(ADP)；氧化型輔酶Ⅱ(NADP+)；疊氮鈉；乙二胺四乙酸(EDTA)；葡萄糖?6?磷酸脫氫酶；腺苷5’?一磷酸雙鈉鹽(AMP)；二腺苷五磷酸鹽(P¹P⁵?diAP)；試劑R2：磷酸肌酸；疊氮鈉；抗人CK?M抗體。本發明在實施過程中控制各組分之間的濃度比在本發明公開的范圍內時試劑盒的穩定性、準確性和精密性都明顯提高，并且操作簡單、制備成本低，適宜于推廣使用。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，具體涉及一種肌酸激酶同工酶測定試劑盒。

背景技術

肌酸激酶(Creatine Kinase，CK)是細胞能量代謝的關鍵酶，其活性測定是臨床骨骼肌疾病、心肌疾病的診斷依據。CK由M、B亞基組成，有三種亞基(同工酶)組合CK-MM、CK-MB、CK-BB，肌肉型(MM)主要存在于各種肌肉細胞中，腦型(BB)主要存在于腦細胞中，雜化型(MB)主要存在于心肌細胞中，肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)是心肌酶譜中最有特異性的酶。

肌酸激酶的同工酶在臨床診斷中有十分重要的意義，在各種病變包括肌肉萎縮和心肌梗塞發生時，人的血清中肌酸激酶水平迅速提高，認為在心肌梗塞的診斷中測定肌酸激酶的活性比做心電圖更為可靠。心肌梗死時，肌酸激酶在起病6小時內升高，24小時達高峰，3-4日內恢復正常。其中肌酸激酶的同工酶CK-MB診斷的特異性最高。肌酸激酶因其具有重要的生理功能和臨床應用價值已引起人們廣泛的重視和深入的研究。

臨床上用于檢測肌酸激酶同工酶(CK-MB)的方法有免疫比濁法、酶聯免疫吸附法和免疫抑制法等。酶聯免疫吸附法檢測耗時且操作復雜，不適用于大批量快速檢測。膠乳增強免疫比濁法反應后會產生膠乳顆粒物的沉淀，不利于儀器的清洗，且檢測精度差。

目前，常規的CK-MB的測定主要采用的是免疫抑制法，它測定的是CK-MB的活力。CK-BB在正常人體內的含量微乎其微，因此該法忽略CK-BB的存在，假設血清中只有CK-MM和CK-MB。在試劑中加入抗CK-M亞單位的多克隆抗體，從而抑制CK-MM和CK-MB中M亞單位活性，測得結果相當于CK-MB中B亞單位活性，將結果乘以2即相當于CK-MB活力。此方法迅速、簡潔、省時、有較高的敏感性，但是在檢測過程中影響因素較多，因此如何對試劑盒進行改進從而更好的發揮此方法的便捷性，成為研究的重要方向。

中國專利申請201610359612.9中公開了一種測定肌酸激酶同工酶(CK-MB)的試劑盒。該發明針對現有技術中檢測肌酸激酶同工酶存在過程復雜、不適用于大批量快速檢測的問題，提出以下的解決方案：一種測定肌酸激酶同工酶(CK-MB)的試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中試劑R1含有緩沖液20-180mmol/L、葡萄糖10-60mmol/L、ADP 0.1-4.0mmol/L、NADP 1-7mmol/L、NAC 5-35mmol/L、HK 0.01-4.00KU/L、G-6-PD0.01-3.00KU/L、其余為純化水；其中試劑R2包含緩沖液20-180mmol/L、CrP 10-50mmol/L、防腐劑0.01-1.0g/L、抗CK-M抗體2100U/L、其余為純化水。該發明具有準確度高、操作方便等優點，該試劑盒中所含試劑種類較多，因此會導致試劑盒穩定性較差，試劑盒的穩定性是評價試劑盒的重要性能之一，而本發明并沒有對試劑盒的穩定性進行研究。