[發明專利]一種高血糖動物模型的構建方法

在審

• 申請號: 202010002787.0
• 申請日: 2020-01-02
• 公開（公告）號: CN111066728A
• 公開（公告）日: 2020-04-28
• 發明（設計）人: 王苗苗;蒙潔妙;張曉春;陳星羽
• 申請（專利權）人: 康美華大基因技術有限公司
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288
• 代理人: 楊艷

本發明公開了一種高血糖動物模型的構建方法，選擇SPF級C57BL/6小鼠，給小鼠連續5天腹腔注射38?42mg/kg·BW的鏈脲佐菌素溶液，注射前禁食3?5h；并在3天后禁食18?22h再腹腔注射95?105mg/kg·BW的鏈脲佐菌素溶液一次；所有注射完成后第3天，測空腹血糖值，血糖值大于12mmol/L的小鼠為I型高血糖動物。本發明設計了合適的鏈脲佐菌素溶液注射方式，分多次給藥，采用不同大小的注射劑量、時間間隔和禁食時間，不需要采用高脂高糖飼料與STZ聯合誘導，動物存活率高，造模周期短，造模成功率高，動物模型血糖值穩定，成本相對較低，可作為降糖藥物及糖尿病發病機制的研究模型。

技術領域

本發明涉及生物模型構建領域，尤其涉及一種高血糖動物模型的構建方法。

背景技術

糖尿病的發病率居高不下，且并發癥較多，給人類健康和社會發展帶來了沉重負擔。目前的治療方法主要是通過藥物或注射胰島素來增加胰島素的分泌從而降低血糖，藥物副作用較大且費用較高，因此研究糖尿病的治療方法成為科學家重點研究內容。其中動物模型是研究糖尿病的一個不可或缺的重要手段及方法，有助于進一步揭示糖尿病的發病機制及干預措施，及各類降血糖藥物的測試篩選。

研究糖尿病的治療方法需要較好的動物模型，目前糖尿病模型多為基因工程動物及藥物高脂聯合誘導模型，但是基因工程模型成本較高，藥物誘導模型，成功率較低或動物死亡率較高。鏈脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)-糖尿病動物模型是目前使用較多的藥物誘導模型，STZ對一定種屬動物的胰島β細胞有選擇性破壞作用，能誘發許多動物產生糖尿病。糖尿病動物模型的制備與STZ注射的方式和劑量有關系，大劑量注射可以直接引起胰島β細胞的廣泛破壞，造成糖尿病模型，但存在死亡率高、成模率差的問題；小劑量STZ則只能破壞一部分胰島β細胞的功能，造成外周組織對胰島素不敏感，需要同時給予高熱量飼料喂養，這種藥物聯合高脂誘導的方法實驗周期較長。因此，需要一種造模成功率高，周期較短，成本相對較低，動物存活率高的造模方法，提高糖尿病治療方法研究的效率。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種高血糖動物模型的構建方法，設計了合適的鏈脲佐菌素溶液注射方式，分多次給藥，采用不同的注射劑量、時間間隔和禁食時間，不需要采用高脂高糖飼料與STZ聯合誘導，動物存活率高，造模周期短，造模成功率高，動物模型血糖值穩定，成本相對較低。

本發明的目的采用如下技術方案實現：

一種高血糖動物模型的構建方法，包括以下步驟：

S1：選擇SPF級C57BL/6小鼠，測空腹血糖，作為基礎血糖值；

S2：給小鼠連續5天腹腔注射38-42mg/kg·BW的鏈脲佐菌素溶液，每次注射前禁食3-5h，自由飲水；

S3：S2步驟完成后第3天，檢測小鼠空腹血糖，并禁食18-22h，自由飲水，然后腹腔注射95-105mg/kg·BW的鏈脲佐菌素溶液一次；

S4：步驟S3完成后第3天，將小鼠禁食5-6h，靜脈采血，檢測空腹血糖值，血糖值大于12mmol/L的小鼠為I型高血糖動物。

優選地，步驟S2中，鏈脲佐菌素溶液的注射量為40mg/kg·BW，注射前禁食時間為4h。

優選地，步驟S3中，禁食時間為20h，鏈脲佐菌素溶液的注射量為100mg/kg·BW。

進一步地，所述小鼠的體重為22.5-25.5g。

優選地，所述小鼠的體重為24.1±1.2g。

所述C57BL/6小鼠為雄性C57BL/6小鼠。

所述靜脈采血為尾靜脈采血。