[發(fā)明專利]基于假Fab的多特異性結(jié)合蛋白

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980090844.0
• 申請(qǐng)日: 2019-12-23
• 公開（公告）號(hào): CN114885609A
• 公開（公告）日: 2022-08-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: C·貝爾;K-C·恩格爾;G·赫斯勒;S·霍爾珀;C·蘭格;T·蘭格;C·萊蒙;W-D·盧希納;S·奧澤爾·布魯?shù)聽?/a>;E·雷奧;N·斯平德勒;S·韋爾
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 賽諾菲
• 主分類號(hào): C07K16/24
• 分類號(hào): C07K16/24;C07K16/28;C07K16/32;C07K16/46
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種結(jié)合蛋白，其包含：

至少一個(gè)假Fab部分，所述至少一個(gè)假Fab部分包含(1)第一VL結(jié)構(gòu)域(VLa)，所述第一VL結(jié)構(gòu)域與第一VH結(jié)構(gòu)域(VHa)配對(duì)以形成結(jié)合靶抗原A的第一功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)；(2)第一穩(wěn)定敲除VH結(jié)構(gòu)域(VHX)，所述第一穩(wěn)定敲除VH結(jié)構(gòu)域與第一穩(wěn)定敲除VL結(jié)構(gòu)域(VLX)配對(duì)以形成第一穩(wěn)定敲除結(jié)構(gòu)域；并且

其中所述穩(wěn)定敲除結(jié)構(gòu)域包含(3)消除其與靶抗原的結(jié)合的一個(gè)或多個(gè)失活突變；和(4)一個(gè)或多個(gè)工程化鏈間二硫鍵。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)合蛋白，其中所述結(jié)合蛋白是多特異性結(jié)合蛋白，所述多特異性結(jié)合蛋白還至少包含第二VL結(jié)構(gòu)域(VLb)，所述第二VL結(jié)構(gòu)域與第二VH結(jié)構(gòu)域(VHb)配對(duì)以形成結(jié)合靶抗原B的第二功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)。

3.一種多特異性結(jié)合蛋白，其包含：

a)第一假Fab部分，所述第一假Fab部分包含(1)第一VL結(jié)構(gòu)域(VLa)，所述第一VL結(jié)構(gòu)域與第一VH結(jié)構(gòu)域(VHa)配對(duì)以形成結(jié)合靶抗原A的第一功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)；(2)第一穩(wěn)定敲除VH結(jié)構(gòu)域(VHX)，所述第一穩(wěn)定敲除VH結(jié)構(gòu)域與第一穩(wěn)定敲除VL結(jié)構(gòu)域(VLX)配對(duì)以形成第一穩(wěn)定敲除結(jié)構(gòu)域；以及

b)第一Fab部分，所述第一Fab部分包含(3)第二VL結(jié)構(gòu)域(VLb)，所述第二VL結(jié)構(gòu)域與第二VH結(jié)構(gòu)域(VHb)配對(duì)以形成結(jié)合靶抗原B的第二功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)；(4)第一CH1結(jié)構(gòu)域，所述第一CH1結(jié)構(gòu)域與第一CL結(jié)構(gòu)域配對(duì)；并且

其中所述穩(wěn)定敲除結(jié)構(gòu)域包含(5)消除其與靶抗原的結(jié)合的一個(gè)或多個(gè)失活突變；和(6)一個(gè)或多個(gè)工程化鏈間二硫鍵。

4.一種多特異性結(jié)合蛋白，其包含：

a)第一假Fab部分，所述第一假Fab部分包含(1)第一VL結(jié)構(gòu)域(VLa)，所述第一VL結(jié)構(gòu)域與第一VH結(jié)構(gòu)域(VHa)配對(duì)以形成結(jié)合靶抗原A的第一功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)；(2)第一穩(wěn)定敲除VH結(jié)構(gòu)域(VHX)，所述第一穩(wěn)定敲除VH結(jié)構(gòu)域與第一穩(wěn)定敲除VL結(jié)構(gòu)域(VLX)配對(duì)以形成第一穩(wěn)定敲除結(jié)構(gòu)域；以及

b)第一Fab部分，所述第一Fab部分包含(3)第二VL結(jié)構(gòu)域(VLb)，所述第二VL結(jié)構(gòu)域與第二VH結(jié)構(gòu)域(VHb)配對(duì)以形成結(jié)合靶抗原B的第二功能性抗原結(jié)合位點(diǎn)；(4)第一CH1結(jié)構(gòu)域，所述第一CH1結(jié)構(gòu)域與第一CL結(jié)構(gòu)域配對(duì)；以及

c)接頭部分，所述接頭部分可操作地連接所述第一Fab部分和所述第一假Fab部分，

其中所述穩(wěn)定敲除結(jié)構(gòu)域包含(5)消除其與靶抗原的結(jié)合的一個(gè)或多個(gè)失活突變；和(6)一個(gè)或多個(gè)工程化鏈間二硫鍵。

5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的結(jié)合蛋白，其中所述接頭部分是肽接頭。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的結(jié)合蛋白，其中所述肽接頭是式(Gly₄Ser)_n的Gly-Ser接頭，其中n是1-10。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的結(jié)合蛋白，其中所述接頭部分是異二聚化結(jié)構(gòu)域。

8.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的結(jié)合結(jié)構(gòu)域，其獨(dú)立地包含一個(gè)或兩個(gè)第一假Fab部分和一個(gè)或兩個(gè)第一Fab部分。

9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的結(jié)合蛋白，其包含選自下組之一的分開的蛋白質(zhì)鏈：

(a)VHa-CH1-L1-VHb-L2-VHX和VLa-CL和VLb-L3-VLX；

(b)VHa-L2-VHX-L1-VHb-CH1和VLa-L3-VLX和VLb-CL；

(c)VHa-CH1-L1-VHa-CH1和VHb-L2-VHX-L3-VHb-L4-VHX和兩條鏈VLb-L5-VLX和兩條鏈VLa-CL；

其中(a)和(b)的鏈可以存在一次或兩次，并且其中L1、L2、L3、L4和L5是可以獨(dú)立地相同或不同的接頭。