[發(fā)明專利]通過發(fā)酵產(chǎn)生1,5-二氨基戊烷的經(jīng)改造的生物合成途徑

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980089266.9
• 申請(qǐng)日: 2019-11-21
• 公開（公告）號(hào): CN113302297A
• 公開（公告）日: 2021-08-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: A·米勒;汪志浩;J·梅林;M·S·侯賽因;S·埃德加
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 齊默爾根公司
• 主分類號(hào): C12N9/88
• 分類號(hào): C12N9/88
• 代理公司: 北京北翔知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11285
• 代理人: 孫占華;張廣育

1.一種表達(dá)非天然的賴氨酸脫羧酶的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞產(chǎn)生1,5-二氨基戊烷。

2.權(quán)利要求1的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞也表達(dá)非天然的1,5-二氨基戊烷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

3.權(quán)利要求1或權(quán)利要求2的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞表達(dá)一種或多種額外的酶，所述酶選自額外的非天然賴氨酸脫羧酶和/或額外的非天然1,5-二氨基戊烷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。

4.權(quán)利要求3的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述額外的酶來自與權(quán)利要求1或權(quán)利要求2中相應(yīng)酶不同的生物體。

5.權(quán)利要求3或權(quán)利要求4的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述額外的酶包含權(quán)利要求1或權(quán)利要求2中相應(yīng)酶的一種或多種額外拷貝。

6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括一種或多種上游賴氨酸途徑的酶的提高的活性，所述提高的活性為相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的提高。

7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括一種或多種酶的提高的活性，所述酶提高了還原形式的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)的供應(yīng)，所述提高的活性為相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的提高。

8.權(quán)利要求7的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中增加了還原形式的NADPH的供應(yīng)的一種或多種酶選自磷酸戊糖途徑的酶、NADP+-依賴性甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)和NADP+-依賴性谷氨酸脫氫酶。

9.權(quán)利要求1-8中任一項(xiàng)的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括一種或多種消耗一種或多種賴氨酸途徑前體的酶的降低的活性，所述降低的活性為相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的降低。

10.權(quán)利要求1-9中任一項(xiàng)的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括天然賴氨酸輸出蛋白的降低的活性，所述降低的活性為相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的降低。

11.權(quán)利要求10的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述天然賴氨酸輸出蛋白為谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium glutamicum)lysE或其直系同源物。

12.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括谷氨酸棒狀桿菌NCgl0561基因或其直系同源物的降低的表達(dá)，所述降低的表達(dá)是相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的降低。

13.權(quán)利要求1-12中任一項(xiàng)的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括谷氨酸棒狀桿菌trpB基因或其直系同源物的降低的表達(dá)，所述降低的表達(dá)是相對(duì)于對(duì)照細(xì)胞的降低。

14.權(quán)利要求9-13中任一項(xiàng)的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述降低的活性是通過一種或多種選自以下的方式實(shí)現(xiàn)的：基因缺失、基因破壞、改變基因調(diào)控、用活性較低的啟動(dòng)子替換天然啟動(dòng)子。

15.經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括用于表達(dá)非天然賴氨酸脫羧酶的工具，且其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞產(chǎn)生1,5-二氨基戊烷。

16.權(quán)利要求15的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞還包括用于表達(dá)非天然1,5-二氨基戊烷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的工具。

17.權(quán)利要求15或權(quán)利要求16的經(jīng)改造的微生物細(xì)胞，其中所述經(jīng)改造的微生物細(xì)胞包括表達(dá)一種或多種額外的酶的工具，所述額外的酶選自額外的非天然賴氨酸脫羧酶和/或額外的非天然1,5-二氨基戊烷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。