[發明專利]快速天然單個細胞質譜分析法

在審

• 申請號: 201980084819.1
• 申請日: 2019-11-15
• 公開（公告）號: CN113196031A
• 公開（公告）日: 2021-07-30
• 發明（設計）人: J·F·卡希爾
• 申請（專利權）人: UT-巴特勒有限公司
• 主分類號: G01N1/02
• 分類號: G01N1/02;G01N15/10;G01N15/12;G01N15/14;G01N27/62;G01N33/48;H01J49/30;H01J49/34;H01J49/40;H01J49/42
• 代理公司: 北京市隆安律師事務所 11323
• 代理人: 權鮮枝

1.一種通過質譜分析法分析來自含有多個細胞的樣本的單個細胞的方法，包括以下步驟：

提供多個細胞和液體介質；

將所述細胞和液體介質置于單個細胞分離噴出系統中；

從所述單個細胞分離噴出系統釋放含有單個細胞的液體介質；

在含有流動的捕獲探頭溶劑的捕獲探頭中捕獲所述液體介質和單個細胞；

用所述捕獲探頭中的裂解誘導器裂解所述細胞以將單個細胞組分分散到所述介質中；

將裂解的單個細胞組分輸送到質譜儀，其中進入該質譜儀的所述裂解的單個細胞組分與進入該質譜儀的來自樣本的另一個單個細胞的任何分散組分在空間和時間上分開；并且，

對所述裂解的單個細胞組分進行質譜分析。

2.根據權利要求1所述的方法，其中所述裂解是由提供比所述細胞的內部壓力低的分壓以引起所述細胞裂解的捕獲探頭溶劑誘導的。

3.根據權利要求2所述的方法，其中所述捕獲探頭溶劑包括選自由甲醇、乙醇、異丙醇、己烷、氯仿、二氯甲烷、乙腈和水組成的組中的至少一種。

4.根據權利要求1所述的方法，其中所述裂解是由化學裂解劑誘導的。

5.根據權利要求4所述的方法，其中所述化學裂解劑包括選自由十二烷基硫酸鈉(SDS)、Triton-X、NP-40裂解緩沖液、RIPA裂解緩沖液、吐溫裂解緩沖液、CHAPS裂解緩沖液和全氟辛酸組成的組中的至少一種。

6.根據權利要求1所述的方法，其中所述裂解是由所述流動的捕獲探頭溶劑形成的液體渦流誘導的。

7.根據權利要求6所述的方法，其中所述液體渦流流量為50～300μL/分鐘并且具有0.5～20秒的洗脫時間。

8.根據權利要求6所述的方法，其中所述液體渦流由同軸探頭形成。

9.根據權利要求1所述的方法，其中所述裂解是由對所述捕獲探頭溶劑中的細胞施加的在細胞兩端為0.2～1.5伏特、持續時間為1～10000微秒的電壓誘導的。

10.根據權利要求1所述的方法，其中所述裂解是由發射到所述捕獲探頭中的細胞處的頻率為15～20kHz、持續時間為0.1～10秒的聲波誘導的。

11.根據權利要求1所述的方法，其中所述單個細胞分離噴出系統的釋放速率為0.1～100個細胞/秒。

12.根據權利要求1所述的方法，其中所述液體介質包括細胞培養基。

13.根據權利要求1所述的方法，其中所述單個細胞分離噴出系統的釋放速率是按需滴落的。

14.一種用于通過質譜分析法分析單個細胞的系統，包括：

單個細胞分離噴出系統，其包括用于樣本的儲存容器，所述樣本包括液體介質中的多個細胞；

捕獲探頭，其包括至少一個用于供捕獲探頭溶劑流動的溶劑供應導管、用于接收由所述單個細胞分離噴出系統釋放的單個細胞并將裂解的細胞組分和捕獲探頭溶劑引導至質譜儀的捕獲探頭排液導管、以及裂解誘導器。

15.根據權利要求14所述的系統，還包括具有連接到所述捕獲探頭排液導管的入口的質譜儀。

16.根據權利要求14所述的系統，其中所述裂解誘導器包括捕獲探頭溶劑，其中所述捕獲探頭溶劑提供比所述細胞的內部壓力低的分壓以引起所述細胞的破裂。

17.根據權利要求16所述的系統，其中所述溶劑包括選自由甲醇、乙醇、異丙醇、己烷、氯仿、二氯甲烷、乙腈和水組成的組中的至少一種。