[發明專利]用于擴增人或動物循環腫瘤細胞的動物模型

有效

• 申請號: 201980084232.0
• 申請日: 2019-10-29
• 公開（公告）號: CN113194716B
• 公開（公告）日: 2023-04-11
• 發明（設計）人: X·魯塞;E·杜斯達;J·維萊特;L·佩恩-蓋;D·邁勒
• 申請（專利權）人: 因紐沃什公司;里昂公立收容所;里昂第一大學
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027;C12N5/095;C12N5/09;G01N33/50
• 代理公司: 北京戈程知識產權代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;程云

本發明涉及用于擴增人或動物循環腫瘤細胞(CTC)的禽模型及其用于隨訪和確定癌癥患者或動物對一種或多種治療劑的敏感性的用途，以及涉及篩選用于治療癌癥的新型治療劑的用途。

技術領域

本發明涉及能夠擴增人或動物循環腫瘤細胞(CTC)的禽模型。

背景技術

CTC是從腫瘤中分離的細胞，在加入血管系統后，其能夠被置換進入血液。因此，這些細胞可以遷移到其他器官并參與轉移的發展。因此，這些細胞代表了一個非常有吸引力的靶標，用于監測癌癥的演變和治療，甚至發現新的療法。

然而，CTC的分離并不是一件容易的事情，因為這些細胞數量很少。因此，有必要在能夠研究它們之前使其擴增。目前，可以在鼠模型中使用體外或體內培養物擴增CTC(Kowalik?A等人，2017；Drapkin?B.J.等人，2018)。已經生成了來自多種癌癥(肺癌、前列腺癌、乳腺癌、泌尿道癌、頭癌或頸癌等)的CTC體外培養物，使得能夠進行治療方案的高速臨床前測試，但是收效有限，因為這些培養物的時間太長，無法與臨床實踐相容，并且使CTC暴露于表型修飾(Pantel?K,Alix-Panabières?C.,2016)。

此外，在鼠模型中建立了來自CTC的短期體內培養，并且在CTC的量過低時在體外擴增的第一步驟后進行(Giuliano?M等人，2015；Williams?ES等人，2015；Torphy?RJ等人，2014；Rossi?E等人，2013)。也考慮了在免疫缺陷小鼠中直接接種CTC作為擴增分離的CTC的方法。在高度轉移性小細胞肺癌(CPPC)中，從具有高水平CTC(每7.5mL血液400CTC)的患者中分離的CTC在小鼠體內形成腫瘤，該腫瘤對鉑和依托泊苷化療的反應對應于臨床觀察(Hodgkinson,C.L.等人，2014)。這些研究為使用免疫缺陷小鼠作為CTC的“孵育器”開辟了道路，能夠生成適應患者個體腫瘤的臨床前模型。

然而，這些模型太昂貴而無法設想系統地使用它們。它們通常需要進行具有上述缺點的體外擴增的預先步驟。最后，這些模型的建立需要時間，這并不總是與預期效果的觀察相一致。

因此，需要找到一種更便宜的體內模型，這樣的模型還可以更快地給出結果，特別是不需要預先的體外擴增階段，以研究這些最接近患者體內存在的CTC。

發明內容

本發明涉及一種用于研究循環腫瘤細胞的動物模型，其由含胚鳥卵構成，優選由含胚雞卵構成，所述動物模型包含從患有癌癥的患者或動物的樣本中分離的人或動物循環腫瘤細胞(CTC)，所述CTC被移植在含胚卵的絨毛尿囊膜(CAM)水平，在移植時所述含胚卵處于與CAM形成相對應并且相當于雞中至少發育8天的發育階段。

該含胚卵是用于擴增CTC的動物模型，更具體地是禽模型。其還使得可以研究不同試劑對腫瘤發生的作用，以選擇具有抗癌活性并因此可代表有效療法的那些試劑，特別是用于治療患者或動物，在含胚卵中移植的CTC源自所述患者或動物。然后這使得可以向患者施用預先在他或她自己的腫瘤細胞上測試過的治療劑；從而導致個體化治療。

本發明還涉及一種制備這種含胚鳥卵模型的方法，使得能夠擴增源自患有癌癥的患者或動物的樣本的人或動物循環腫瘤細胞(CTC)，所述方法包括在含胚鳥卵的絨毛尿囊膜(CAM)水平上移植從所述樣本中分離的CTC，所述含胚鳥卵處于與CAM形成相對應并且相當于雞中至少發育8天的發育階段。

本發明的主旨還涉及一種擴增從患有癌癥的患者或動物的樣本中分離的人或動物循環腫瘤細胞(CTC)的方法，所述方法包括以下步驟：

a)通過在含胚鳥卵的絨毛尿囊膜(CAM)水平上移植從患有癌癥的患者或動物的樣本中分離的CTC，制備根據本發明的含胚卵模型，所述含胚鳥卵處于與CAM形成相對應并且相當于雞中至少發育8天的發育階段，

b)收集從擴增的CTC發展而成的腫瘤，和任選地

c)從步驟b)收集的腫瘤中回收CTC。