[發(fā)明專利]組合癌癥免疫療法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201980079237.4
• 申請日: 2019-10-17
• 公開（公告）號: CN113164518A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設計）人: T·K-T·盧;R·M·格德萊;J·T-C·林;B·S·加里森;P·J·李;A·岡薩雷斯-瓊卡;王敦弘;D·弗里曼森
• 申請（專利權(quán)）人: 森迪生物科學公司
• 主分類號: A61K35/14
• 分類號: A61K35/14;A61K35/28;A61P35/00;C12N5/0775;C12N5/078;C12N5/10;C12N15/85;C12N15/86
• 代理公司: 北京市金杜律師事務所 11256
• 代理人: 陳文平;袁元

1.一種工程化細胞，所述工程化細胞包含：

a)啟動子；和

b)外源性多核苷酸序列，其包含下式所述的表達盒，從5’至3’定向，所述式包含：

S1-E1-L-S2-E2

其中

S1包含編碼第一信號肽的多核苷酸序列，

E1包含編碼第一效應分子的多核苷酸序列，

L包含接頭多核苷酸序列，

S2包含編碼第二信號肽的多核苷酸序列，

E2包含編碼第二效應分子的多核苷酸序列，并且

其中所述啟動子可操作地連接于所述表達盒，所述第一信號肽可操作地連接于所述第一效應分子，并且所述第二信號肽可操作地連接于所述第二效應分子，

并且其中所述工程化細胞選自由以下組成的組：間充質(zhì)干細胞(MSC)、干細胞、免疫細胞、自然殺傷(NK)細胞、NKT細胞、固有淋巴樣細胞、腫瘤浸潤淋巴細胞(TIL)、肥大細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞、中性粒細胞、骨髓細胞、樹突狀細胞、T細胞、CD8+T細胞、CD4+T細胞、細胞毒性T淋巴細胞(CTL)、病毒特異性T細胞、γ-δT細胞、調(diào)節(jié)T細胞和B細胞。

2.如權(quán)利要求1所述的工程化細胞，其中所述啟動子可操作地連接于所述表達盒，以使得所述多核苷酸能夠轉(zhuǎn)錄為包含所述式S1-E1-L-S2-E2的單一多核苷酸。

3.如權(quán)利要求1或2所述的工程化細胞，其中所述接頭多核苷酸序列與所述第一效應分子和所述第二效應分子翻譯為不同的多肽可操作地相關聯(lián)。

4.如權(quán)利要求3所述的工程化細胞，其中所述接頭多核苷酸序列編碼2A核糖體跳躍標簽或編碼內(nèi)部核糖體進入位點(IRES)，任選地其中當所述接頭多核苷酸序列編碼2A核糖體跳躍標簽時，所述2A核糖體跳躍標簽選自由以下組成的組：P2A、T2A、E2A和F2A。

5.如權(quán)利要求1所述的工程化細胞，其中所述接頭多核苷酸序列編碼第二啟動子，

其中所述啟動子可操作地連接于所述表達盒，以使得包含式S1-E1的第一多核苷酸能夠得以轉(zhuǎn)錄，

其中所述第二啟動子可操作地連接于所述表達盒，以使得包含式S2-E2的第二多核苷酸能夠得以轉(zhuǎn)錄，并且其中所述第一多核苷酸和所述第二多核苷酸為不同的多核苷酸。

6.如權(quán)利要求1-5中任一項所述的工程化細胞，其中所述工程化細胞為人類細胞，任選地其中所述人類細胞從選自由以下組成的組的組織分離：骨髓、脂肪組織、臍帶、胎肝、肌肉和肺組織。

7.如權(quán)利要求1-6中任一項所述的工程化細胞，其中所述工程化細胞為MSC，并且其中MSC包含：包含CD105+、CD73+、CD90+、CD45-、CD34-、CD14-的細胞標志物表型；包含CD105+、CD73+、CD90+、CD11b-、CD79α-的細胞標志物表型；包含CD105+、CD73+、CD90+、CD19-、II類HLA-的細胞標志物表型；或包含CD73+、CD90+、CD105+和CD166+、CD11b-、CD14-、CD19-、CD34-、CD45-和HLA-DR-的細胞標志物表型。

8.如權(quán)利要求1-7中任一項所述的工程化細胞，其中所述啟動子和/或所述第二啟動子包含組成型啟動子，任選地其中所述組成型啟動子選自由以下組成的組：CMV、EFS、SFFV、SV40、MND、PGK、UbC、hEF1aV1、hCAGG、hEF1aV2、hACTb、heIF4A1、hGAPDH、hGRP78、hGRP94、hHSP70、hKINb和hUBIb。

9.如權(quán)利要求1-7中任一項所述的工程化細胞，其中所述啟動子和/或所述第二啟動子包含誘導型啟動子，任選地其中所述誘導型啟動子選自由以下組成的組：minP、NFkB應答元件、CREB應答元件、NFAT應答元件、SRF應答元件1、SRF應答元件2、AP1應答元件、TCF-LEF應答元件啟動子融合物、低氧應答元件、SMAD結(jié)合元件、STAT3結(jié)合位點、誘導分子應答型啟動子和它們的串聯(lián)重復序列。