[發明專利]二價雙特異性抗體及其制備方法、編碼基因、宿主細胞、組合物

有效

• 申請號: 201980078998.8
• 申請日: 2019-12-26
• 公開（公告）號: CN113330037B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 馮曉;金磊;王濤;郭洪瑞;劉爽;陳宇珩;韓寧;梁陽秋
• 申請（專利權）人: 長春金賽藥業有限責任公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;C07K16/00;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 北京集佳知識產權代理有限公司 11227
• 代理人: 溫可睿

1.二價雙特異性抗體，其特征在于，所述二價雙特異性抗體包括：

（1）a)?特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1以及鉸鏈區部分序列，其連接順序依次為重鏈IgG1恒定區CH1、鉸鏈區部分序列、柔性肽和單鏈可變片段scFv；和b)?特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL，其連接順序依次為單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL，其中特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO:?20和SEQ?ID?NO:?21所示，特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?IDNO:?18和SEQ?ID?NO:?19所示，所述輕鏈恒定區CL為kappa鏈恒定區，所述鉸鏈區部分序列為：EPKSCDK；

（2）a)?特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1以及鉸鏈區部分序列，其連接順序依次為重鏈IgG1恒定區CH1、鉸鏈區部分序列、柔性肽和單鏈可變片段scFv；和b)?特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL，其連接順序依次為單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL，其中特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO:?18和SEQ?ID?NO:?19所示，特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?IDNO:?20和SEQ?ID?NO:?21所示，所述輕鏈恒定區CL為kappa鏈恒定區，所述鉸鏈區部分序列為：EPKSCDK；

（3）a)?特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1以及鉸鏈區部分序列，其連接順序依次為單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1和鉸鏈區部分序列；和b)?特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL，其連接順序依次為輕鏈恒定區CL和單鏈可變片段scFv，其中特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO:?20和SEQ?ID?NO:?21所示，特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?IDNO:?18和SEQ?ID?NO:?19所示，所述輕鏈恒定區CL為kappa鏈恒定區，所述鉸鏈區部分序列為：EPKSCDK；或者

（4）a)?特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1以及鉸鏈區部分序列，其連接順序依次為單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1和鉸鏈區部分序列；和b)?特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL，其連接順序依次為輕鏈恒定區CL和單鏈可變片段scFv，其中特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?ID?NO:?18和SEQ?ID?NO:?19所示，特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv中VL和VH的氨基酸序列分別如SEQ?IDNO:?20和SEQ?ID?NO:?21所示，所述輕鏈恒定區CL為kappa鏈恒定區，所述鉸鏈區部分序列為：EPKSCDK。

2.權利要求1所述二價雙特異性抗體的制備方法，其特征在于，其包括下列步驟：

a)?用以下載體轉化宿主細胞，

第一載體，其包括編碼特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1以及鉸鏈區部分序列的核酸分子，和

第二載體，其包括編碼特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL的核酸分子；

b)?在容許合成抗體分子的條件下培養所述宿主細胞；

c)?從培養物中回收所述抗體分子。

3.編碼權利要求1所述二價雙特異性抗體的基因，其特征在于，其包括：

第一核酸分子，其為編碼特異性結合第一抗原的抗體的單鏈可變片段scFv、柔性肽、重鏈IgG1恒定區CH1以及鉸鏈區部分序列的核酸分子；和

第二核酸分子，其為編碼特異性結合第二抗原的抗體的單鏈可變片段scFv和輕鏈恒定區CL的核酸分子。