[發(fā)明專利]新型酮糖3－差向異構(gòu)酶在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201980076912.8 | 申請日： | 2019-11-21 |
| 公開（公告）號： | CN113166788A | 公開（公告）日： | 2021-07-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 秋光和也;何森健;吉原明秀;加藤志郎;望月進;吉田裕美;神鳥成弘 | 申請（專利權(quán)）人： | 國立大學(xué)法人香川大學(xué) |
| 主分類號： | C12P19/02 | 分類號： | C12P19/02;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/20;C12N1/21;C12N15/61;C12N15/63;C12N9/90;C12N11/02;C12N5/10 |
| 代理公司： | 北京尚誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11322 | 代理人： | 龍淳;謝弘 |
| 地址： | 日本*** | 國省代碼： | 暫無信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 新型 差向異構(gòu) | ||
1.一種來自屬于節(jié)桿菌(
利用SDS-PAGE測得的分子量為36kDa，具有下述(A)和(B)的底物特異性，
(A)具有使D－或L－酮糖的3位差向異構(gòu)化并生成對應(yīng)的D－或L－酮糖的活性，
(B)在D－或L－己酮糖中對于D－阿盧糖的3位的差向異構(gòu)化活性最高。
2.如權(quán)利要求1所述的酮糖3－差向異構(gòu)酶，其特征在于：
具有下述(C)和(D)的物理化學(xué)性質(zhì)，
(C)反應(yīng)最佳pH為6～8，
(D)反應(yīng)最佳溫度為60℃。
3.如權(quán)利要求1或2所述的酮糖3－差向異構(gòu)酶，其特征在于：
底物特異性的順序為D－阿盧糖、D－塔格糖、L－塔格糖、D－果糖、L－阿盧糖。
4.如權(quán)利要求1～3中任一項所述的酮糖3－差向異構(gòu)酶，其特征在于：
屬于節(jié)桿菌屬的微生物為噬組氨醇節(jié)桿菌(
5.如權(quán)利要求1～4中任一項所述的酮糖3－差向異構(gòu)酶，其特征在于：
屬于節(jié)桿菌屬的微生物為在國際專利生物保藏中心以保藏編號NITE BP－02813保藏的噬組氨醇節(jié)桿菌Y586－1株。
6.一種蛋白質(zhì)，其為以下(a)或(b)所述的蛋白質(zhì)：
(a)包含序列編號1所示的氨基酸序列的蛋白質(zhì)，
(b)包含與序列編號1所示的氨基酸序列具有70％以上同一性的氨基酸序列的、具有下述(A)和(B)的酮糖3－差向異構(gòu)酶活性、且在反應(yīng)溫度為70℃和50℃中的酮糖3－差向異構(gòu)酶活性的比(T70/T50)為1.55以上的蛋白質(zhì)，
(A)具有使D－或L－酮糖的3位差向異構(gòu)化并生成對應(yīng)的D－或L－酮糖的活性，
(B)在D－或L－己酮糖中對于D－阿盧糖的3位的差向異構(gòu)化活性最高。
7.一種蛋白質(zhì)，其為以下(a)或(b)所述的蛋白質(zhì)：
(a)包含序列編號1所示的氨基酸序列的蛋白質(zhì)，
(b)包含與序列編號1所示的氨基酸序列具有70％以上同一性的氨基酸序列的、具有下述(A)和(B)的酮糖3－差向異構(gòu)酶活性，且在60℃保溫1小時后的殘留活性為31％以上的蛋白質(zhì)，
(A)具有使D－或L－酮糖的3位差向異構(gòu)化并生成對應(yīng)的D－或L－酮糖的活性，
(B)在D－或L－己酮糖中對于D－阿盧糖的3位的差向異構(gòu)化活性最高。
8.一種蛋白質(zhì)，其特征在于：
其為由包含序列編號1所示的氨基酸序列的蛋白質(zhì)的氨基酸取代突變體構(gòu)成的蛋白質(zhì)，所述突變體在序列編號1所示的氨基酸序列中選自H56、T59、A60、P77、L94、L97、D101、A109、A128、V129、V132、S144、S167、P172、E199、A200、K202、S218中的至少1個部位具有氨基酸取代，具有下述(A)和(B)的酮糖3－差向異構(gòu)酶活性，并且，與包含序列編號1所示的氨基酸序列的蛋白質(zhì)相比，在反應(yīng)溫度70℃和50℃的酮糖3－差向異構(gòu)酶活性的比(T70/T50)更高，或者在60℃保溫1小時后的殘留活性更高，
(A)具有使D－或L－酮糖的3位差向異構(gòu)化并生成對應(yīng)的D－或L－酮糖的活性，
(B)在D－或L－己酮糖中對于D－阿盧糖的3位的差向異構(gòu)化活性最高。
9.編碼權(quán)利要求6～8中任一項所述的蛋白質(zhì)的DNA。
10.一種DNA，其特征在于：
包含序列編號2所示的堿基序列或與其互補的序列。
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