[發(fā)明專(zhuān)利]多年生單子葉植物嫁接

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980075737.0
• 申請(qǐng)日: 2019-11-14
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113163717A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·里夫斯;J·希伯德
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 劍橋企業(yè)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): A01G2/35
• 分類(lèi)號(hào): A01G2/35
• 代理公司: 北京北翔知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11285
• 代理人: 孫占華;張廣育

1.一種產(chǎn)生嫁接的多年生單子葉植物的方法，其包括：

(a)提供包含第一多年生單子葉植物的中胚軸和胚根組織的根莖源；

(b)提供包含第二不同的多年生單子葉植物的中胚軸和胚芽組織的接穗源；

(c)使所述根莖源與所述接穗源接觸，使得所述根莖源和接穗源融合；

(d)使根莖源和接穗源融合，使得在根莖源和接穗源之間形成功能性維管連接；和

(e)從所述融合的根莖源和接穗源中產(chǎn)生嫁接的多年生單子葉植物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述第一年生單子葉植物和第二多年生單子葉植物均是：

(i)鴨跖草類(lèi)單子葉植物；優(yōu)選選自以下目：棕櫚目、姜目、禾本目和鴨跖草目；或

(ii)百合類(lèi)單子葉植物；優(yōu)選選自以下目：櫻井草目、薯蕷目、露兜樹(shù)目、百合目和天門(mén)冬目。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述根莖源和所述接穗源之間的融合在所述嫁接的多年生單子葉植物的壽命中是穩(wěn)定的。

4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的方法，其中：

(i)步驟(c)包括在所述根莖源和所述接穗源之間的接觸處施加以下一種或多種：包含相同的多年生單子葉植物物種的浸泡過(guò)的胚乳的糊劑、粘合劑和嫁接蠟；

(ii)步驟(d)包括使融合的根莖源和接穗源在硝酸纖維素膜上生長(zhǎng)；優(yōu)選地，其中所述生長(zhǎng)是在黑暗中于20至28℃的溫度下持續(xù)2至4天，然后暴露于光照下7天；和/或

(iii)步驟(e)包括在組織培養(yǎng)中或在土壤上產(chǎn)生嫁接的多年生單子葉植物。

5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述方法還包括：

(i)在步驟(a)之前對(duì)根莖源和/或接穗源進(jìn)行表面殺菌的步驟；和/或

(ii)在步驟(d)之后評(píng)估根莖源和接穗源之間功能性維管連接的存在。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中所述評(píng)估包括：

(i)將根莖源和接穗源拉開(kāi)，其中阻力表明在根莖源和接穗源之間存在功能性維管連接；或

(ii)將示蹤染料施加到根莖源上并觀察接穗源，其中接穗源中示蹤染料的存在表明在根莖源與接穗源之間存在功能性維管連接；優(yōu)選地，其中所述示蹤染料為二醋酸羧基熒光素(CFDA)。

7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述接穗源通過(guò)組織培養(yǎng)中的微型繁殖獲得，并且所述根莖源從胚組織獲得和/或通過(guò)組織培養(yǎng)中的微型繁殖獲得。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其中所述胚組織從種子獲得；優(yōu)選地，其中所述種子：

(i)包含其種皮；

(ii)是干燥的或在水中吸漲的；優(yōu)選在水中吸漲8至72小時(shí)；和/或

(iii)在黑暗中部分發(fā)芽；優(yōu)選持續(xù)2至30天

然后在從所述種子中獲得胚組織。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中用厚度為0.1至0.3mm的刀刃切割所述種子；優(yōu)選用：

(i)刀片，例如剃刀刀片；或

(ii)組織打孔器；更優(yōu)選地，其中所述組織打孔器的直徑為0.75至3.5mm；最優(yōu)選地，其中所述組織打孔器的直徑為1.2mm。

10.根據(jù)權(quán)利要求7至9中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述接穗源在含有細(xì)胞分裂素的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基上微型繁殖；優(yōu)選地，其中所述細(xì)胞分裂素為：

(i)N⁶-芐基腺嘌呤(BAP)；

(ii)激動(dòng)素；

(iii)玉米素；

(iv)二氫玉米素；

(v)噻苯隆(TDZ)；

(vi)二苯基脲；

(vii)6-芐氨基-9-(2-四氫吡喃基)-9H-嘌呤(BPA)；

(viii)氯吡脲；或

(ix)N⁶-異戊烯腺嘌呤(2iP)。