[發明專利]具有結合對的成員的涂覆有鏈霉親和素的固相

在審

• 申請號: 201980075342.0
• 申請日: 2019-11-14
• 公開（公告）號: CN113039287A
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發明（設計）人: F·貝格曼;D·海因德爾;T·厄爾施萊格爾;J·施特克爾
• 申請（專利權）人: 豪夫邁·羅氏有限公司
• 主分類號: C12Q1/6834
• 分類號: C12Q1/6834;G01N33/543
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 甘霖;李唐

1.一種固相，其涂覆有(鏈霉)親和素并且具有以生物素：(鏈霉)親和素相互作用的方式與其連接的結合對的經生物素化的第一成員，其中所連接的第一成員能夠與所述結合對的第二成員結合但不能與生物素或與(鏈霉)親和素結合，其中當所述第二成員是包含分析物、分析物類似物和分析物特異性捕獲劑中任意項的綴合物的部分時，所述第二成員能夠變為被所述第一成員結合，并且其中所述結合對的成員無一能夠與天然存在的單鏈核酸雜交。

2.根據權利要求1所述的固相，其可以通過根據權利要求10所述的方法獲得。

3.根據權利要求1或權利要求2所述的固相，其中所述結合對選自由以下項組成的組：

第一寡核苷酸鏡像體和第二寡核苷酸鏡像體，其各自由含有L-核糖的核苷單體或含有L-2′-脫氧核糖的核苷單體組成，所述第一寡核苷酸鏡像體能夠與所述第二寡核苷酸鏡像體雜交；

由β-L-LNA核苷單體組成的第一寡聚物和第二寡聚物，所述第一寡聚物能夠與所述第二寡聚物雜交；

抗原和抗原特異性抗體；

半抗原和半抗原特異性抗體；

配體和特異性配體結合結構域；

寡糖或多糖和凝集素，所述凝集素能夠與所述寡糖或多糖特異性結合；

組氨酸標簽和包含選自Zn²⁺、Ni²⁺、Co²⁺和Cu²⁺的金屬離子的金屬螯合復合物，所述金屬螯合復合物能夠與所述組氨酸標簽結合；

銦螯合復合物和CHA255抗體；

葫蘆[n]脲主體殘基和能夠與所述主體殘基結合的客體殘基；和

第一蛋白質二聚化結構域和第二蛋白質二聚化結構域，任選地在二聚化誘導劑或增強劑的存在下。

4.根據權利要求1至3中任一項所述的固相，其中所述固相選自由以下項組成的組：微粒、微孔板、試管、比色皿、膜、石英晶體、片、濾紙、盤和芯片。

5.根據權利要求4所述的固相，其中所述固相是直徑為0.05μm至200μm的微粒。

6.根據權利要求5所述的固相，其中所述微粒是單分散的順磁珠。

7.根據權利要求6所述的固相，其中所述珠的所述直徑為約3μm。

8.根據權利要求1至7中任一項所述的固相，其中所述固相與水性液相接觸。

9.根據權利要求8所述的固相，其中所述液相中包含綴合物，所述綴合物包含所述結合對的第二成員。

10.一種制備具有與其連接的結合對的成員的固相的方法，所述方法包括以下步驟：

(a)提供涂覆有(鏈霉)親和素的固相；

(b)選擇具有第一成員和第二成員的結合對；

(c)提供在步驟(b)中選擇的所述結合對的所述第一成員；

(d)將步驟(c)的所述第一成員生物素化；

(e)通過使獲自步驟(d)的所述經生物素化的第一成員與步驟(a)的經涂覆的固相接觸并對其進行孵育，將所述經生物素化的第一成員與所述固相連接，從而將所述經生物素化的第一成員以生物素-(鏈霉)親和素相互作用的方式與所述固相連接；

其中在步驟(b)中，選擇所述對，使得

在不經生物素化的情況下，所述結合對的所述第一成員和所述第二成員不能與鏈霉親和素結合，

以經生物素化的形式并且通過生物素：(鏈霉)親和素鍵的方式與所述經涂覆的固相非共價連接，所述結合對的所述第一成員能夠與所述第二成員結合，

以經綴合的形式并且與分析物特異性捕獲劑共價連接，所述結合對的所述第二成員能夠與連接到所述固相的所述經生物素化的第一成員結合，并且

所述結合對的成員無一能夠與天然存在的單鏈核酸雜交；

從而獲得所述具有與其連接的所述結合對的所述成員的固相。