[發明專利]免疫測定用杯及其制造方法、以及免疫測定方法

在審

• 申請號: 201980069401.3
• 申請日: 2019-10-10
• 公開（公告）號: CN113167790A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: 鹽谷俊人;佐藤弘
• 申請（專利權）人: 凸版印刷株式會社
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N21/64;G01N21/78;G01N33/536
• 代理公司: 北京天昊聯合知識產權代理有限公司 11112
• 代理人: 常海濤;金小芳

該熒光免疫測定用杯是在使用作為熒光標記的微珠、并且利用抗原抗體反應的免疫系統的分析中所使用的熒光免疫測定用杯，具有底面部和與所述底面部連接的側面部，所述底面部具有各容納1個所述微珠的多個孔狀部，所述孔狀部之間的區域的上表面為平面狀。

技術領域

本發明涉及在利用生物體的抗原抗體反應以進行各種生物體分子或癌細胞等的檢查的免疫系統的分析中所使用的免疫測定用杯及其制造方法、以及免疫測定方法。

本申請要求基于2018年10月24日提出的日本專利申請2018-199985號的優先權，其內容援引在本文中。

背景技術

抗原是病原性的病毒、細菌、花粉、雞蛋以及小麥等會引起生物體發生免疫應答的物質。抗體是用于將進入到體內的抗原排出到體外而產生的免疫球蛋白的蛋白質總稱。例如，疫苗是通過施予無毒化的病原性細菌或病毒，促使其在體內產生對抗病原體的抗體，從而獲得對感染病的免疫。

在病原菌或癌細胞的檢測、DNA的基因分析、或者環境有害物質等的測定等的所謂生物體測量的領域中，通過利用免疫反應對待測定的生物體物質(例如抗原)和與之選擇性結合的檢查用物質(例如抗體)之間的結合進行測定，可以實現對所述抗原等的種類和數量的測量。

如下述非專利文獻1所記載的那樣，作為公知的免疫系統的檢查方法，一般采用以下方法：通過熒光色素、同位素等其他標記物質(以下，稱為標記物)對用于捕捉待測定檢體所含有的抗原的抗體直接或間接地進行標記，測量捕捉后(抗原抗體反應后)的來自標記物的熒光量或放射線量，從而用于診斷。

作為用于抗原等的測定的標記物，與需要嚴格管理的放射性同位素相比，一般使用操作方便的熒光標記物等。在使用熒光標記物等的光學方法中，通過使帶有熒光標記物的抗體與抗原結合，測定來自該標記物的發光以進行抗原的測定和分析。作為其代表性方法，在酶免疫分析(例如，酶聯免疫吸附劑測定：Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay，ELISA)法中，利用的是附加在與抗原結合的抗體上的熒光標記物與試劑中的酶發生反應所產生的熒光。

為了易于觀察生物體分子并識別測定對象的生物體分子，可以將金膠體或微粒等與熒光標記物一起附加到每個生物體分子上。例如，可以使用聚苯乙烯微珠作為微粒。通過將熒光標記物或微粒附加到生物體分子上，可以使由光學顯微鏡的分辨率難以觀察到的尺寸的分子變得可視化。以下，將熒光標記物與微粒的組合記為熒光微珠或簡記為微珠。

如上所述，在免疫測定中利用抗原抗體反應的分析中，為了添加含有待測定檢體的血液等液體(以下，以血液為代表)、作為熒光標記的熒光微珠、促進發光(發色)反應的試劑等，可以使用試管類型的容器(例如，參照專利文獻1、2)。

圖10A是傳統的免疫測定用杯50的俯視圖以及從正面的剖面圖。圖10B是表示將多個熒光微珠62滴入到所述免疫測定用杯50中的狀態的示意性剖面圖。

即使使用傳統的免疫測定用杯50，也可以檢測出癌細胞等細胞水平的檢測或大型蛋白質等大分子量的物質(例如分子量為60kDa以上)。另一方面，從圖10B可以推測：當將多個熒光微珠62從滴加用夾具前端部61滴入到傳統的免疫測定用杯50中時，熒光微珠62的排列變得不均勻。因此，熒光微珠62分散在血液和試劑混合的液體中，熒光因散射而減弱。因此，難以正確地測定并分析小分子量的蛋白質，例如5～60kDa左右的細胞因子等。

現有技術文獻

專利文獻

專利文獻1：日本專利第4095176號公報

專利文獻2：日本專利第4522434號公報

非專利文獻

非專利文獻1：簡單免疫學、p195～201、株式會社南江堂(2001年)

發明內容

本發明要解決的課題