[發明專利]嵌合黃病毒麗沙病毒疫苗

在審

• 申請號: 201980069355.7
• 申請日: 2019-09-06
• 公開（公告）號: CN113164582A
• 公開（公告）日: 2021-07-23
• 發明（設計）人: k·達爾邁爾;N·米什拉;J·奈茨;L·桑切斯
• 申請（專利權）人: 勒芬天主教大學
• 主分類號: A61K39/12
• 分類號: A61K39/12;A61P31/14
• 代理公司: 中國貿促會專利商標事務所有限公司 11038
• 代理人: 陳曉娜

1.一種多核苷酸，其包含活的感染性減毒黃病毒的序列，其中編碼麗沙病毒G蛋白的至少一部分的核苷酸序列位于所述黃病毒的E和NS1基因之間的基因間區域處，使得嵌合病毒得以表達，其特征在于，在所述黃病毒的E蛋白的C末端和所述黃病毒的NS1蛋白的信號肽的N末端的編碼序列以下列次序包含：

-黃病毒NS1蛋白的另一信號肽，

-麗沙病毒G蛋白，所述麗沙病毒G蛋白包含功能缺陷的信號肽或缺少功能性信號肽，包含IIb表位，包含C末端TM膜序列和包含C末端胞質序列，以及

-黃病毒E蛋白的TM2結構域。

2.根據權利要求1所述的多核苷酸，其中所述活的感染性減毒黃病毒的序列是黃熱病病毒，典型地是YF17D株。

3.根據權利要求1所述的多核苷酸，其中所述活的感染性減毒黃病毒是嵌合病毒。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的多核苷酸，其中所述麗沙病毒是狂犬病病毒。

5.根據權利要求4所述的多核苷酸，其中所述狂犬病病毒G蛋白是ERA株的G蛋白。

6.根據權利要求1-5中任一項所述的多核苷酸，其中所述G蛋白的核苷酸序列為在哺乳動物細胞中表達提高進行了密碼子優化。

7.根據權利要求1-6中任一項所述的多核苷酸，其中所述NS1蛋白的信號肽包含序列DQGCAINFG[SEQ ID NO:6]或由序列DQGCAINFG[SEQ ID NO:6]組成。

8.根據權利要求1-7中任一項所述的多核苷酸，其中所述IIb表位具有序列GCTNLSGFS[SEQ ID NO:15]。

9.根據權利要求1-8中任一項所述的多核苷酸，其中所述黃病毒E蛋白的TM2結構域來自西尼羅病毒。

10.根據權利要求1-9中任一項所述的多核苷酸，其中黃病毒E蛋白的TM2結構域具有序列RSIAMTFLAVGGVLLFLSVNVHA[SEQ ID NO 13]。

11.根據權利要求1-10中任一項所述的多核苷酸，其中Rab G的功能缺陷的信號肽包含F14S突變。

12.根據權利要求1-10中任一項所述的多核苷酸，其中所述Rab G缺少氨基酸1-19的N末端信號序列MVPQALLFVPLLVFPLCFG[SEQ ID NO 18]。

13.根據權利要求1-12中任一項所述的多核苷酸，其中所述嵌合病毒的序列在黃病毒E基因、NS1信號肽和Rab G蛋白的連接處包含序列LGVGA DQGCAINFG KFPIY[SEQ ID NO:21]。

14.根據權利要求1-13中任一項所述的多核苷酸，其中所述嵌合病毒的序列在WNV TM2結構域、NS1信號序列和YFV的連接處包含序列VNVHA DQGCAINFG KRELK[SEQ ID NO:22]。

15.根據權利要求1-15中任一項所述的多核苷酸，其中所述嵌合病毒的編碼序列包含SEQ ID NO:2的序列或與SEQ ID NO:2的序列具有95％或99％序列同一性的序列。

16.根據權利要求1-16中任一項所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含SEQ ID NO:1的序列或與SEQ ID NO:1的序列具有95％或99％序列同一性的序列。

17.根據權利要求1-16中任一項所述的多核苷酸，所述多核苷酸是細菌人工染色體。