[發(fā)明專(zhuān)利]生物樣品中的抗體定量

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980069152.8
• 申請(qǐng)日: 2019-09-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN112955220A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-06-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: G·古迪;S·戈恩;E·弗盧赫
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 伊克諾斯科學(xué)公司
• 主分類(lèi)號(hào): A61P35/00
• 分類(lèi)號(hào): A61P35/00;C07K16/28;C07K16/32;G01N33/68
• 代理公司: 北京市中倫律師事務(wù)所 11410
• 代理人: 鐘錦舜;王奕勛

1.一種用于定量生物樣品中的雙特異性抗體的方法，其中所述抗體包括工程化的人IgG CH3異二聚體，所述異二聚體包括CH3結(jié)構(gòu)域中的多個(gè)取代，包含第一CH3結(jié)構(gòu)域的位置80到88處的至少兩個(gè)取代，其中所述方法包括通過(guò)質(zhì)譜法定量所述抗體的特征肽，其中所述特征肽是對(duì)應(yīng)于所述第一CH3結(jié)構(gòu)域的位置80到88的胰蛋白酶肽，并且其中所述氨基酸位置根據(jù)編號(hào)指示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述特征肽由以下序列組成：

TX₁PPX₂LX₃SX₄GSFX₅LX₆SX₇(SEQ ID NO:1)

其中X₁代表T或D，X₂代表V、L、P或M，X₃代表D、Q或E，X₄代表D或Q，

X₅代表F、A或W，X₆代表S、W或H，并且X₇代表K或R，前提是當(dāng)X₁為T(mén)時(shí)，X₂、X₃、X₄、X₅和X₇中的至少一個(gè)使得X₂為L(zhǎng)、P或M；X₃為Q或E；X₄為Q；X₅為A或W；并且X₇為R。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其中所述特征肽選自由以下組成的組：TTPPVLDSDGSFALSSK(SEQ ID NO:3)、TDPPLLESDGSFALSSR(SEQ ID NO:4)、TDPPLLESQGSFALSSR(SEQ ID NO:5)、TTPPPLQSDGSFWLWSK(SEQ ID NO:6)和TTPPMLESDGSFFLHSK(SEQ ID NO:7)，優(yōu)選地，SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5。

4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述雙特異性抗體包括使用基于T細(xì)胞受體的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域界面工程化的人IgG CH3結(jié)構(gòu)域異二聚體，其中所述第一CH3結(jié)構(gòu)域來(lái)自人IgG1并且至少包括取代F85.1A和Y86S，而所述第二CH3結(jié)構(gòu)域來(lái)自人IgG1或IgG3并且至少包括取代S20K、T22V、K26T、K79Y、K88W和T90N，并且其中所述位置根據(jù)編號(hào)指示。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中：

-所述第一CH3結(jié)構(gòu)域進(jìn)一步包括以下取代中的一個(gè)或多個(gè)：Q3E、Y5A、L7F、S20T、T22V、K26T、T81D、V84L、D84.2E、K88R和T90R；優(yōu)選地，Q3E、Y5A、L7F、S20T、T22V、K26T、T81D、V84L、D84.2E、K88R和T90R或Q3E、Y5A、L7F、S20T、T22V、K26T、T81D、V84L、D84.2E和K88R；并且

-所述第二CH3結(jié)構(gòu)域進(jìn)一步包括以下取代中的一個(gè)或多個(gè)：Q3A、D12E、L14M、N44S、V84M、F85.1S、Y86V、V101I、H115R和Y116F；優(yōu)選地，F(xiàn)85.1S和Y86V；對(duì)于來(lái)自人IgG1的CH3結(jié)構(gòu)域，F(xiàn)85.1S、Y86V和Q3A，而對(duì)于來(lái)自人IgG3的CH3結(jié)構(gòu)域，D12E、L14M、N44S、V84M、F85.1S、Y86V、V101I、H115R和Y116F。

6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的方法，其中所述抗體包括使用人IgG和IgD CH3結(jié)構(gòu)域之間的免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域界面交換工程化的人IgG CH3結(jié)構(gòu)域異二聚體，其中所述第一CH3結(jié)構(gòu)域包括以下取代：Q3V、Y5L、K26S、V84P、D84.2Q、F85.1W和Y86W，并且所述第二CH3結(jié)構(gòu)域包括以下取代：S20W、K79A、T81A、K88V和T90R。