[發明專利]核酸分離及相關方法

在審

• 申請號: 201980065458.6
• 申請日: 2019-08-16
• 公開（公告）號: CN113015800A
• 公開（公告）日: 2021-06-22
• 發明（設計）人: A·I·庫蒂亞文;O·Z·納納西;D·塞爾蓋耶夫;A·A·高爾
• 申請（專利權）人: 塞弗德公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 北京泛華偉業知識產權代理有限公司 11280
• 代理人: 郭廣迅

提供了使用果膠衍生物改性的固體載體。所述固體載體用于核酸分離、分離和檢測方法。

相關申請的交叉引用

本申請要求于2018年8月17日提交的美國臨時申請第62/765,149號的權益，其全部內容通過引用并入本文。

發明領域

本發明涉及包含改性的果膠的固體載體及其使用方法。

背景

與傳統的診斷方法相比，借助各種自動化分析技術，例如聚合酶鏈反應(PCR)，利用核酸擴增和/或檢測的分子診斷分析可以在更短的時間內提供快速而準確的結果，并且可以容易地自動化。然而，為了對生物樣品進行分子診斷分析，必須從生物材料中分離核酸，以去除可能例如通過抑制聚合酶活性影響分析準確性的組分。即使存在多種用于核酸提取的方法，但是當前可用的方法通常涉及冗長的步驟，并且不易于自動化。因此，在擴增和檢測特定靶標之前制備核酸樣品是分子診斷學中最具挑戰性的步驟。

需要簡單且快速的核酸分離方法來制備不含擴增抑制劑的有質量的核酸，所述方法不需要大量樣品處理并且可以適應臨床實驗室自動化。需要能夠以與快速、自動化的核酸檢測方法兼容的方式促進從包含核酸的生物樣品中分離核酸的試劑。本發明滿足了該需要，并提供了進一步的相關優點。

概述

一方面，本文提供了固體載體，其包含共價結合到所述固體載體的多個改性的果膠分子。在一些實施方案中，所述改性的果膠包含多個氨基。在一些實施方案中，所述改性的果膠是酰胺化果膠。在一些實施方案中，所述酰胺化果膠包含一個或多個由下式表示的單元，其異構體、鹽或互變異構體：

其中

n是0、1、2或3；

R1為H或C1-C3烷基；

X在每次出現時獨立地為C2-C4亞烷基或C4-C6雜亞烷基；

Y為C2-C3亞烷基或C4-C6雜亞烷基；和

R2和R3獨立地為H或C1-C3烷基。

在一些實施方案中，所述酰胺化果膠是用C4-C20多胺酰胺化的果膠。在一些實施方案中，所述多胺是乙二胺、腐胺、尸胺、精胺或亞精胺。

在一些實施方案中，所述酰胺化果膠包含一個或多個具有以下結構的單元，其異構體、鹽或互變異構體：

其中

n是0、1、2或3；

m為2、3或4；

p為2、3或4；和

R1、R2和R3獨立地為H或C1-C3烷基。

在一些實施方案中，所述酰胺化果膠包含一個或多個具有以下結構的單元，其異構體、鹽或互變異構體：

在一些實施方案中，所述酰胺化果膠為酰胺化柑橘果膠或酰胺化蘋果果膠。在一些實施方案中，所述酰胺化果膠具有約4,000Da至約500,000Da、約5,000Da至約300,000Da、約100,000Da至約300,000Da或約50,000Da至約200,000Da的分子量。

在一些實施方案中，所述固體載體包含選自聚苯乙烯、玻璃、陶瓷、聚丙烯、聚乙烯、二氧化硅、氧化鋯、二氧化鈦、氧化鋁、聚碳酸酯、乳膠、聚醚砜、PMMA、羧甲基纖維素、沸石和纖維素的材料。