[發明專利]免疫層析試驗片

在審

• 申請號: 201980061831.0
• 申請日: 2019-09-26
• 公開（公告）號: CN112740039A
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 酒井駿;河野景吾;伊藤佳菜子;中島旭;森田元喜
• 申請（專利權）人: 積水醫療株式會社
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 中科專利商標代理有限責任公司 11021
• 代理人: 宋明;張瑩

本發明要解決的問題是提供一種試驗片，其能夠避免在免疫層析試驗片中發生所謂的漂白現象，從而能夠實現更好的檢測和可視性。本發明要解決的另一個問題是提供一種能夠防止測試線上的檢測值的變異的免疫層析試驗片。本發明通過至少包括多孔膜并且具有樣品施加區域、展開區域和固定有特異性結合物質的檢測區域的免疫層析試驗片來解決前述問題，其中該檢測區域固定在多孔膜的表面上，并且其中在所述多孔膜的背面上設置有厚度為30μm以上且200μm以下的不透明基材。

技術領域

本發明涉及免疫層析試驗片及使用該試驗片的免疫層析檢測方法。

背景技術

隨著用于患者附近處理的POCT(護理點測試，point of care testing)的普及，使用由硝酸纖維素膜等制成的試驗片的側流式免疫層析檢測方法已經廣泛用作使用抗原-抗體反應的簡單免疫測定法。

基于免疫層析的試驗片(本文稱為免疫層析試驗片)通常由位于多孔膜上的樣品施加區域、展開區域和檢測區域構成。膜被構造成使得靶向特定分析物的檢測抗體與樣品結合并且能夠沿著展開區域向下到達檢測區域。負責分析物檢測的抗體固定在稱為檢測區域的展開區域上的某個位置。

當將樣品滴加到樣品施加區域上且樣品包含分析物時，則該分析物特異性地與標記的抗體結合以形成復合體。該復合體在展開區域的下游方向上展開，并與固定抗體結合以在檢測區域中進行檢測。因此，通過在檢測區域中檢測標記抗體、分析物和固定抗體的夾心復合體，可以定性或定量地分析分析物。

在具有上述構造的免疫層析試驗片的檢測區域中檢測分析物與綴合物的復合體的方法包括測量來自標記的反射光的強度以計算吸光度(反射吸光度)的方法。通過使用在分析物的檢測線上測得的反射光強度與檢測區域兩側的兩個相鄰區域的比值來計算反射吸光度。如果使用此方法，則可能由于在檢測復合體的檢測區域的上游側或下游側附近反射光強度的非特異性增加而干擾測量波形。在這種情況下，當分析物的濃度較低時，不能忽略測量波形的干擾并且不能減去基線，不能精確地檢測到特定信號(峰值)，這可能導致測量本身無法進行。

由于測量波形中的干擾頻率和測量波形中的擾動程度不是恒定的，因此降低了每個測量的可重復性，并且在每次測量中必須校正為合適的測量值(換言之，確認測量波形)。

在使用白色膜的常規免疫層析檢測方法中，測量波形的干擾可以以下現象在視覺上觀察到，即膜上的特定位置看起來比周圍的顏色相對更白，好像該位置被漂白了(所謂的漂白現象；以下也簡稱為漂白)。這妨礙了對標記產生的顏色的視覺確認，并可能導致測試結果準確性下降。

盡管這種漂白的原因尚不清楚，但據推測是由于試驗片的制造量不同，試驗片的保存條件不同，以及試驗片的制造條件(例如預處理條件)不同而引起的。

關于消除這種漂白現象的方法，已知以下文件。

專利文件1公開了一種使用樣品稀釋劑的測定法，該稀釋劑中添加了甲醇，以防止在長期保存免疫層析試驗片時經常觀察到的漂白。

專利文件2公開了通過用特定的表面活性劑例如正辛基-β-D-葡糖苷處理免疫層析試驗片的固定有抗體的膜來防止漂白和測量波形的干擾的方法。

引文清單

專利文獻

專利文件1：WO 2015/080286

專利文件2：WO 2010/001598

發明內容

技術問題

本發明要解決的問題是提供一種試驗片，其能夠通過與現有技術完全不同的方法避免在免疫層析試驗片中發生所謂的漂白現象，以更好的可視性進行檢測。本發明要解決的另一個問題是提供一種能夠防止測試線上的檢測值變異的免疫層析試驗片。

解決問題的方案