[發(fā)明專利]用于細(xì)胞聲致穿孔的微泡的分配設(shè)備

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201980061308.8
• 申請(qǐng)日: 2019-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113166704A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: A·德拉蘭德;M·勒貝爾特;M·德拉蘭德;C·皮雄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 國(guó)家科學(xué)研究中心;奧爾良大學(xué)
• 主分類號(hào): C12M1/42
• 分類號(hào): C12M1/42;C12N15/87
• 代理公司: 北京戈程知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11314
• 代理人: 程偉;王錦陽(yáng)

本發(fā)明描述了一種用于細(xì)胞聲致穿孔的微泡(30)的分配設(shè)備(10)，所述設(shè)備包括：?管，其配置為容納包含微泡(30)溶液(26)的樣品瓶(20)，?至少兩個(gè)導(dǎo)管(11、12)，其布置在管內(nèi)，并且當(dāng)管容納所述樣品瓶時(shí)，所述導(dǎo)管通向樣品瓶(20)，其中，當(dāng)?shù)谝粚?dǎo)管(11)連接到第一空氣注入源時(shí)，空氣可以經(jīng)由第一導(dǎo)管注入所述樣品瓶(20)以在樣品瓶中產(chǎn)生超壓，所述樣品瓶(20)中包含的微泡(30)進(jìn)入第二導(dǎo)管(12)并朝向其第二端(122)移動(dòng)。本發(fā)明還涉及一種聲致穿孔設(shè)備、一種聲致穿孔方法和一種計(jì)算機(jī)軟件產(chǎn)品。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞轉(zhuǎn)染領(lǐng)域，具體地，涉及使用微泡的聲致穿孔(sonoporation)。本發(fā)明更具體地涉及一種微泡的分配設(shè)備，以及借助于這種設(shè)備進(jìn)行細(xì)胞聲致穿孔的方法。

背景技術(shù)

細(xì)胞轉(zhuǎn)染是一種與轉(zhuǎn)導(dǎo)相反、在不借助病毒的情況下將活性分子(例如核酸、化療分子、標(biāo)記物、蛋白質(zhì)等)導(dǎo)入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的方法。

細(xì)胞聲致穿孔是一種利用超聲波改變細(xì)胞的穿透性，從而能夠?qū)⒒钚苑肿訉?dǎo)入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染方法。

例如在文獻(xiàn)WO 2015/110955中描述了一種已知類型的聲致穿孔設(shè)備。該設(shè)備包括一個(gè)超聲波換能器，該換能器處于填充有液體的罐的底部，并向位于移動(dòng)結(jié)構(gòu)上的待轉(zhuǎn)染細(xì)胞發(fā)射超聲波。

在已知的方式中，通過(guò)將活性分子封裝在微泡中，可以大大提高聲致穿孔操作的效率。然后將包含活性分子的微泡與待轉(zhuǎn)染細(xì)胞接觸，并在換能器發(fā)射的超聲波的作用下振動(dòng)。所述微泡與待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的相互作用會(huì)穿透待轉(zhuǎn)染細(xì)胞的膜，從而使活性分子能夠進(jìn)入待轉(zhuǎn)染細(xì)胞。

一個(gè)問(wèn)題是微泡在待轉(zhuǎn)染細(xì)胞上的分配是由使用微吸管的使用者手動(dòng)進(jìn)行的。這樣的分配是繁瑣的，并且導(dǎo)致聲致穿孔操作的效率低下。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提出一種用于細(xì)胞聲致穿孔的微泡的分配設(shè)備，該設(shè)備與已知類型的設(shè)備相比效率得到提高。

根據(jù)第一方面，本發(fā)明涉及一種用于細(xì)胞聲致穿孔的微泡的分配設(shè)備，其特征在于，所述設(shè)備包括：

-管，其關(guān)于豎直軸線對(duì)稱，所述管配置為容納包含微泡的溶液的樣品瓶，

-至少兩個(gè)導(dǎo)管，所述導(dǎo)管布置在管內(nèi)，所述導(dǎo)管至少部分地定向?yàn)榛旧掀叫杏谪Q直軸線，每個(gè)導(dǎo)管在第一端具有孔口，當(dāng)所述管容納樣品瓶時(shí)，所述孔口適于通向樣品瓶，第一導(dǎo)管適于連接到第一空氣注入源，第二導(dǎo)管具有第二端，

其中，當(dāng)?shù)谝粚?dǎo)管連接到第一空氣注入源時(shí)，空氣可以經(jīng)由第一導(dǎo)管的孔口注入到樣品瓶中，注入的空氣在樣品瓶中產(chǎn)生超壓，使得樣品瓶中包含的微泡經(jīng)由第二導(dǎo)管的第一端的孔口進(jìn)入第二導(dǎo)管，然后在第二導(dǎo)管內(nèi)朝向第二導(dǎo)管的第二端移動(dòng)。

這樣的設(shè)備能夠自動(dòng)分配精確和受控量的微泡，而不需要對(duì)使用者的部件的手動(dòng)操作。與使用者必須用手握住包含微泡的移液管的情況不同，該設(shè)備提供了微泡分配位置的改進(jìn)的精確度，管和導(dǎo)管的位置是固定的。

這樣的設(shè)備因此使得微泡分配效率得到提高。

此外，微泡的這種分配不需要與微泡接觸，這在聲致穿孔期間保護(hù)細(xì)胞免受任何生物污染。

微泡分配設(shè)備可以包括第三導(dǎo)管，所述第三導(dǎo)管至少部分地位于所述第二導(dǎo)管的至少一部分附近，所述第三導(dǎo)管適于連接到第二空氣注入源。所述第三導(dǎo)管使得能夠通過(guò)第二空氣注入源分離已經(jīng)移動(dòng)到第二導(dǎo)管的第二端的微泡，以將它們分配給待轉(zhuǎn)染細(xì)胞。利用第三導(dǎo)管沉積微泡更快且更精確。

本發(fā)明還涉及一種包括所述微泡的分配設(shè)備的細(xì)胞聲致穿孔設(shè)備。

所述聲致穿孔設(shè)備可以包括第一空氣注入源，所述第一空氣注入源連接到第一導(dǎo)管。該第一空氣注入源使得能夠?qū)⒖諝庾⑷胛⑴莘峙湓O(shè)備所容納的樣品瓶中，從而迫使微泡通過(guò)第二導(dǎo)管并將其移動(dòng)到第二導(dǎo)管的第二端。