[發(fā)明專利]分析方法及試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201980056876.9
• 申請日: 2019-08-02
• 公開（公告）號: CN112639124A
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 橋本幸二;稻田美雅;伊藤桂子
• 申請（專利權(quán)）人: 株式會社東芝
• 主分類號: C12Q1/6851
• 分類號: C12Q1/6851;G01N33/53
• 代理公司: 中國貿(mào)促會專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 11038
• 代理人: 鄭天松

1.判定所述對象中的胰腺癌的罹患的有無的分析方法，其包括對于對象來源的試樣中的hsa-miR-122-5p進(jìn)行定量。

2.輔助所述對象中的胰腺癌的罹患的有無的判定的分析方法，其包括對于對象來源的試樣中的hsa-miR-122-5p進(jìn)行定量。

3.權(quán)利要求1或2所述的方法，其中所述胰腺癌的罹患的有無的判定不使用hsa-miR-122-5p以外的標(biāo)志物的檢測或定量結(jié)果進(jìn)行。

4.權(quán)利要求1～3之任一項所述的方法，其還包括在所述對象中的hsa-miR-122-5p的存在量比對照中的hsa-miR-122-5p的存在量多時，判定為所述對象罹患胰腺癌的判定工序。

5.權(quán)利要求1～4之任一項所述的方法，其中所述胰腺癌的罹患的有無的判定包括所述對象中的胰腺癌的預(yù)后判定、或者所述對象中的胰腺癌的再發(fā)的有無的判定。

6.權(quán)利要求1～5之任一項所述的方法，其中所述胰腺癌的罹患的有無的判定與其他癌區(qū)別進(jìn)行。

7.權(quán)利要求6所述的方法，其中所述其他癌含乳腺癌、大腸癌、胃癌、肺癌、卵巢癌、前列腺癌、膽管癌、食道癌、肝臟癌、腦腫瘤、膀胱癌、肉瘤、子宮體癌及子宮肉瘤。

8.權(quán)利要求1～7之任一項所述的方法，其中所述試樣是血清。

9.權(quán)利要求1～8之任一項所述的方法，其中所述定量使用選自下列的至少1種核酸進(jìn)行：用于擴(kuò)增hsa-miR-122-5p的引物組(以下稱為“第1引物組”)、用于逆轉(zhuǎn)錄hsa-miR-122-5p的逆轉(zhuǎn)錄用引物、用于延伸hsa-miR-122-5p的延伸用引物、及用于檢測hsa-miR-122-5p的核酸探針。

10.權(quán)利要求9所述的方法，其中所述定量包括：

(S1-1)使含與hsa-miR-122-5p的序列(以下稱為“第1序列”)雜交的第1引物部及第1LAMP識別序列的逆轉(zhuǎn)錄用引物的所述第1引物部與所述第1序列雜交，逆轉(zhuǎn)錄所述第1序列，得到含所述第1序列的互補序列(以下稱為“第1a的序列”)的逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的逆轉(zhuǎn)錄工序、

(S1-2)使所述逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物和所述hsa-miR-122-5p解離的解離工序、

(S1-3)使含與所述第1a的序列雜交的第2引物部及第2LAMP識別序列的延伸用引物的所述第2引物部與所述逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的所述第1a的序列雜交，使所述延伸用引物及所述逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物以互相作為模板延伸而得到含所述第1a的序列的互補序列的延伸產(chǎn)物的延伸工序、

(S1-4)使用第1引物組、由LAMP反應(yīng)擴(kuò)增所述延伸產(chǎn)物，得到擴(kuò)增產(chǎn)物的擴(kuò)增工序、及

(S1-5)檢測得到的所述擴(kuò)增產(chǎn)物的檢測工序。

11.權(quán)利要求9或10所述的方法，其中所述第1引物組：

含SEQ ID NO:8的FIP引物、SEQ ID NO:9的BIP引物及SEQ ID NO:10的LB引物，

含SEQ ID NO:8的FIP引物、SEQ ID NO:9的BIP引物及SEQ ID NO:11的LB引物，

含SEQ ID NO:12的FIP引物、SEQ ID NO:13的BIP引物及SEQ ID NO:10的LB引物，或者

含SEQ ID NO:14的FIP引物、SEQ ID NO:15的BIP引物及SEQ ID NO:10的LB引物，

所述逆轉(zhuǎn)錄用引物含SEQ ID NO:2，所述延伸用引物含SEQ ID NO:3，

所述逆轉(zhuǎn)錄用引物含SEQ ID NO:4，所述延伸用引物含SEQ ID NO:5，或者

所述逆轉(zhuǎn)錄用引物含SEQ ID NO:6，所述延伸用引物含SEQ ID NO:7。